Mine otse sisu juurde
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Kude
Gingiva
Sünonüümid
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Dokumendid

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Toote number 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese igemepiirkonna fibroblastid (hGF) on suuõõne igemepiirkonna sidekoest saadud primaarsed rakud. Need fibroblastid mängivad olulist rolli igemekoe struktuurilise terviklikkuse säilitamisel, tootes rakuvälise maatriksi komponente, sealhulgas kollageeni, elastiini ja glükosaminoglükaane. Nende võime paljuneda ja migreeruda on oluline haavade paranemiseks, kudede taastamiseks ja parodontiidi raviks. Lisaks oma struktuursetele rollidele osalevad hGF ka gingiva põletikulises reaktsioonis, suheldes erinevate immuunrakkudega ja vahendades tsütokiinide ja kasvufaktorite vabanemist. See teeb neist olulise rakumudeli suuõõne tervise, parodontiidi ja kudede regenereerimise uurimiseks.

hGF rakke kasutatakse laialdaselt suuõõne bioloogiat käsitlevates uuringutes, eelkõige parodontiidi patofüsioloogia mõistmisel, kus fibroblastide ja patogeensete bakterite, nagu *Porphyromonas gingivalis*, vaheline koostoime pakub suurt huvi. Neid rakke kasutatakse ka koetehnoloogias ja regeneratiivses meditsiinis, eriti igemete ja parodondi defektide ravimeetodite väljatöötamisel. Nende reaktsiooni erinevatele biomaterjalidele, kasvufaktoritele ja rakuvälise maatriksi komponentidele uuritakse sageli, et optimeerida koe taastamise ja regenereerimise tingimusi suukirurgias ja hambaimplantaatide puhul.

Kude
Gingiva
Rakendused
Kudede regenereerimine, haavade paranemise uuringud
Sünonüümid
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Annetaja

Doonori vanus
Lot-specific (see CoA)
Etniline kuuluvus
Lot-specific (see CoA)

03Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Kogupõhine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

04Omadused

Morfoloogia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
No

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogrammi/L insuliini
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
More than 4,000 cells/cm²
Vedeliku vahetus
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Taastumine pärast sulamist

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Sulatamine ja kasvatamine
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimise keskkonda kasutame 90% FBS + 10% DMSO elujõulisuse säilitamiseks või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Tunnused

Viide
Inimese igemefibroblastid (hGF) (Cytioni katalooginumber 300703)
NCBI maksukood
9606