Skip to content
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Tissue
เหงือก
Synonyms
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Documents

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Product number 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไฟโบรบลาสต์ของเหงือกมนุษย์ (hGF) เป็นเซลล์ปฐมภูมิที่ได้มาจากเนื้อเยื่อเกี่ยวพันของเหงือกหรือเนื้อเยื่อเหงือกในช่องปาก เซลล์ไฟโบรบลาสต์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการรักษาความสมบูรณ์ของโครงสร้างเนื้อเยื่อเหงือกโดยการผลิตองค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ ซึ่งรวมถึงคอลลาเจน อีลาสติน และไกลโคซามิโนไกลแคน ความสามารถในการเพิ่มจำนวนและเคลื่อนย้ายของเซลล์เหล่านี้มีความจำเป็นต่อการหายของแผล การซ่อมแซมเนื้อเยื่อ และการตอบสนองต่อโรคปริทันต์นอกเหนือจากบทบาททางโครงสร้างแล้ว hGF ยังมีบทบาทในการตอบสนองการอักเสบภายในเหงือก โดยมีการปฏิสัมพันธ์กับเซลล์ภูมิคุ้มกันต่าง ๆ และช่วยในการปล่อยไซโตไคน์และปัจจัยการเจริญเติบโต ซึ่งทำให้ hGF เป็นแบบจำลองเซลล์ที่สำคัญสำหรับการศึกษาสุขภาพช่องปาก โรคปริทันต์ และการฟื้นฟูเนื้อเยื่อ

เซลล์ hGF ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยที่มุ่งเน้นชีววิทยาช่องปาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทำความเข้าใจพยาธิสรีรวิทยาของโรคปริทันต์ ซึ่งปฏิสัมพันธ์ระหว่างไฟโบรบลาสต์กับแบคทีเรียก่อโรค เช่น *Porphyromonas gingivalis* เป็นประเด็นที่น่าสนใจอย่างยิ่งเซลล์เหล่านี้ยังถูกนำมาใช้ในวิศวกรรมเนื้อเยื่อและเวชศาสตร์ฟื้นฟู โดยเฉพาะในการพัฒนาวิธีการรักษาสำหรับความบกพร่องของเหงือกและปริทันต์ การตอบสนองของพวกมันต่อวัสดุชีวภาพต่างๆ ปัจจัยการเจริญเติบโต และองค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวางเพื่อปรับสภาพให้เหมาะสมสำหรับการซ่อมแซมและฟื้นฟูเนื้อเยื่อในศัลยกรรมช่องปากและการปลูกถ่ายฟัน

Tissue
เหงือก
Applications
การฟื้นฟูเนื้อเยื่อ, การศึกษาการรักษาแผล
Synonyms
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Donor

Donor age
Lot-specific (see CoA)
Ethnicity
Lot-specific (see CoA)

03Classification

Organism
Human
Sex
Lot-specific
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

04Characteristics

Morphology
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
No

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, bFGF 10 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, อินซูลิน 10 ไมโครกรัม/ลิตร
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
More than 4,000 cells/cm²
Fluid renewal
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Post-thaw recovery

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Thawing and culturing
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ FBS 90% + DMSO 10% เพื่อรักษาความมีชีวิต หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Identifiers

Citation
ไฟโบรบลาสต์ของเหงือกมนุษย์ (hGF) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300703)
NCBI TaxID
9606