Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Primary cell · Product number 300703
Oral fibroblasts for periodontal and dental research
Customization / Recommendations
- Human Gingival Fibroblasts (hGF)Primary cell€650.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ไฟโบรบลาสต์ของเหงือกมนุษย์ (hGF) เป็นเซลล์ปฐมภูมิที่ได้มาจากเนื้อเยื่อเกี่ยวพันของเหงือกหรือเนื้อเยื่อเหงือกในช่องปาก เซลล์ไฟโบรบลาสต์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการรักษาความสมบูรณ์ของโครงสร้างเนื้อเยื่อเหงือกโดยการผลิตองค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ ซึ่งรวมถึงคอลลาเจน อีลาสติน และไกลโคซามิโนไกลแคน ความสามารถในการเพิ่มจำนวนและเคลื่อนย้ายของเซลล์เหล่านี้มีความจำเป็นต่อการหายของแผล การซ่อมแซมเนื้อเยื่อ และการตอบสนองต่อโรคปริทันต์นอกเหนือจากบทบาททางโครงสร้างแล้ว hGF ยังมีบทบาทในการตอบสนองการอักเสบภายในเหงือก โดยมีการปฏิสัมพันธ์กับเซลล์ภูมิคุ้มกันต่าง ๆ และช่วยในการปล่อยไซโตไคน์และปัจจัยการเจริญเติบโต ซึ่งทำให้ hGF เป็นแบบจำลองเซลล์ที่สำคัญสำหรับการศึกษาสุขภาพช่องปาก โรคปริทันต์ และการฟื้นฟูเนื้อเยื่อ
เซลล์ hGF ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยที่มุ่งเน้นชีววิทยาช่องปาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทำความเข้าใจพยาธิสรีรวิทยาของโรคปริทันต์ ซึ่งปฏิสัมพันธ์ระหว่างไฟโบรบลาสต์กับแบคทีเรียก่อโรค เช่น *Porphyromonas gingivalis* เป็นประเด็นที่น่าสนใจอย่างยิ่งเซลล์เหล่านี้ยังถูกนำมาใช้ในวิศวกรรมเนื้อเยื่อและเวชศาสตร์ฟื้นฟู โดยเฉพาะในการพัฒนาวิธีการรักษาสำหรับความบกพร่องของเหงือกและปริทันต์ การตอบสนองของพวกมันต่อวัสดุชีวภาพต่างๆ ปัจจัยการเจริญเติบโต และองค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวางเพื่อปรับสภาพให้เหมาะสมสำหรับการซ่อมแซมและฟื้นฟูเนื้อเยื่อในศัลยกรรมช่องปากและการปลูกถ่ายฟัน
- Tissue
- เหงือก
- Applications
- การฟื้นฟูเนื้อเยื่อ, การศึกษาการรักษาแผล
- Synonyms
- HGF
- HFIB-G
- Human fibroblasts
- gingiva
- provitro 1210412
02Donor
- Donor age
- Lot-specific (see CoA)
- Ethnicity
- Lot-specific (see CoA)
03Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Lot-specific
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
04Characteristics
- Morphology
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Cell type
- ไฟโบรบลาสต์
- Tumourigenic
- No
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, bFGF 10 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, อินซูลิน 10 ไมโครกรัม/ลิตร
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- More than 4,000 cells/cm²
- Fluid renewal
- 24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
- Post-thaw recovery
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Thawing and culturing
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ FBS 90% + DMSO 10% เพื่อรักษาความมีชีวิต หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Identifiers
- Citation
- ไฟโบรบลาสต์ของเหงือกมนุษย์ (hGF) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300703)
- NCBI TaxID
- 9606
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
