Siirry sisältöön
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Kudos
Gingiva
Synonyymit
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Asiakirjat

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Tuotenumero 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Valmistetaan tilauksesta
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Ihmisen ientaskun fibroblastit (hGF) ovat primaarisia soluja, jotka ovat peräisin suuontelon ientaskun eli ienkudoksen sidekudoksesta. Näillä fibroblasteilla on kriittinen rooli ientaskukudoksen rakenteellisen eheyden ylläpitämisessä tuottamalla solunulkoisen matriisin komponentteja, kuten kollageenia, elastiinia ja glykosaminoglykaaneja. Niiden kyky lisääntyä ja vaeltaa on olennainen haavan paranemisen, kudoksen korjaamisen ja parodontiitin reagoinnin kannalta. Rakenteellisten tehtäviensä lisäksi hGF osallistuu ientulehdusreaktioihin ientaskussa vuorovaikutuksessa erilaisten immuunisolujen kanssa ja välittää sytokiinien ja kasvutekijöiden vapautumista. Tämä tekee niistä tärkeän solumallin suun terveyden, parodontiitin ja kudosten uudistumisen tutkimiseen.

hGF-soluja käytetään laajalti suun biologiaan keskittyvässä tutkimuksessa, erityisesti parodontiittien patofysiologian ymmärtämisessä, jossa fibroblastien ja patogeenisten bakteerien, kuten *Porphyromonas gingivalis*, välinen vuorovaikutus kiinnostaa merkittävästi. Näitä soluja hyödynnetään myös kudosteknologiassa ja regeneratiivisessa lääketieteessä, erityisesti ientulehdusten ja parodontiittivirheiden hoitomuotojen kehittämisessä. Niiden reaktiota erilaisiin biomateriaaleihin, kasvutekijöihin ja solunulkoisen matriksin komponentteihin tutkitaan usein, jotta voidaan optimoida olosuhteet kudosten korjaamiseksi ja uudistamiseksi suukirurgiassa ja hammasimplanttien istutuksessa.

Kudos
Gingiva
Sovellukset
Kudoksen uusiutuminen, Haavan paranemisen tutkimukset
Synonyymit
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Lot-specific (see CoA)
Etnisyys
Lot-specific (see CoA)

03Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Tonttikohtainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

04Ominaisuudet

Morfologia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Solutyyppi
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
No

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 10 ng/mL bFGF:llä, 10 mikrogrammaa/l insuliinia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
More than 4,000 cells/cm²
Nesteen uusiminen
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Sulamisen jälkeinen palautuminen

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Sulatus ja viljely
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 90 % FBS + 10 % DMSO:ta elinkelpoisuuden ylläpitämiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Tunnisteet

Lähdeviite
Ihmisen ientaskun fibroblastit (hGF) (Cytionin luettelonumero 300703)
NCBI-verotunnus
9606