Ga naar de inhoud
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Weefsel
Tandvlees
Synoniemen
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Documenten

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Productnummer 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op bestelling gemaakt
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Human Gingival Fibroblasts (hGF) zijn primaire cellen afkomstig van het bindweefsel van de gingiva, of tandvleesweefsel, in de mondholte. Deze fibroblasten spelen een cruciale rol in het behoud van de structurele integriteit van het tandvleesweefsel door extracellulaire matrixcomponenten te produceren, waaronder collageen, elastine en glycosaminoglycanen. Hun vermogen om te prolifereren en te migreren is essentieel voor wondgenezing, weefselherstel en de reactie op parodontale aandoeningen. Naast hun structurele rol zijn hGF betrokken bij ontstekingsreacties in de gingiva, door interactie met verschillende immuuncellen en het mediëren van het vrijkomen van cytokinen en groeifactoren. Hierdoor zijn ze een belangrijk cellulair model voor het bestuderen van mondgezondheid, parodontale aandoeningen en weefselregeneratie.

hGF cellen worden op grote schaal gebruikt in onderzoek gericht op orale biologie, met name bij het begrijpen van de pathofysiologie van tandvleesaandoeningen, waarbij de interactie tussen fibroblasten en pathogene bacteriën zoals *Porphyromonas gingivalis* van groot belang is. Deze cellen worden ook gebruikt in tissue engineering en regeneratieve geneeskunde, met name bij de ontwikkeling van therapieën voor gingivale en parodontale defecten. Hun reactie op verschillende biomaterialen, groeifactoren en extracellulaire matrixcomponenten wordt vaak bestudeerd om de omstandigheden voor weefselherstel en regeneratie in de mondchirurgie en tandheelkundige implantaten te optimaliseren.

Weefsel
Tandvlees
Toepassingen
Weefselregeneratie, Onderzoek naar wondgenezing
Synoniemen
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Donateur

Leeftijd van de donor
Lot-specific (see CoA)
Etnische afkomst
Lot-specific (see CoA)

03Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Lot-specifiek
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

04Kenmerken

Morfologie
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Celtype
Fibroblast
Tumorverwekkend
No

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 10 ng/mL bFGF, 10 microgram/L insuline
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
More than 4,000 cells/cm²
Vloeistofverversing
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Herstel na ontdooiing

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Ontdooien en kweken
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 90% FBS + 10% DMSO om de levensvatbaarheid te behouden, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Identificatiegegevens

Bronvermelding
Humane gingivale fibroblasten (hGF) (Cytion catalogusnummer 300703)
NCBI-belastingnummer
9606