
- Audums
- Gingiva
- Sinonīmi
- HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412
Dokumenti
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Primary cell · Preces numurs 300703
Oral fibroblasts for periodontal and dental research
Pielāgošana / Ieteikumi
- Human Gingival Fibroblasts (hGF)Primary cell€650.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
Cilvēka smaganu fibroblasti (hGF) ir primārās šūnas, kas iegūtas no mutes dobuma gingīvu jeb smaganu saistaudiem. Šiem fibroblastiem ir izšķiroša nozīme smaganu audu strukturālās integritātes uzturēšanā, jo tie ražo ekstracelulārā matriksa sastāvdaļas, tostarp kolagēnu, elastīnu un glikozaminoglikānus. To spēja proliferēt un migrēt ir būtiska brūču dzīšanai, audu atjaunošanai un atbildes reakcijai uz periodonta slimībām. Papildus strukturālajām funkcijām hGF ir iesaistīti iekaisuma reakcijās smaganās, mijiedarbojoties ar dažādām imūnšūnām un starpniekojot citokīnu un augšanas faktoru izdalīšanos. Tas padara tās par galveno šūnu modeli mutes dobuma veselības, periodonta slimību un audu reģenerācijas izpētei.
hGF šūnas plaši izmanto pētījumos, kas vērsti uz mutes dobuma bioloģiju, jo īpaši periodonta slimību patofizioloģijas izpratnē, kur lielu interesi izraisa fibroblastu un patogēno baktēriju, piemēram, *Porphyromonas gingivalis*, mijiedarbība. Šīs šūnas tiek izmantotas arī audu inženierijā un reģeneratīvajā medicīnā, jo īpaši izstrādājot terapiju smaganu un periodonta defektu ārstēšanai. Bieži tiek pētīta to reakcija uz dažādiem biomateriāliem, augšanas faktoriem un ekstracelulārā matriksa komponentiem, lai optimizētu apstākļus audu atjaunošanai un reģenerācijai mutes dobuma ķirurģijā un zobu implantos.
- Audums
- Gingiva
- Pieteikumi
- Audu reģenerācija, brūču dzīšanas pētījumi
- Sinonīmi
- HGF
- HFIB-G
- Human fibroblasts
- gingiva
- provitro 1210412
02Ziedotājs
- Donora vecums
- Lot-specific (see CoA)
- Etniskā piederība
- Lot-specific (see CoA)
03Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Atkarībā no partijas
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
04Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Šūnu tips
- Fibroblasti
- Tumorogēns
- No
05Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramu/l insulīna
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- More than 4,000 cells/cm²
- Šķidruma atjaunošana
- 24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
- Atgūšanās pēc atkusņa
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Atkausēšana un kultivēšana
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 90 % FBS + 10 % DMSO dzīvotspējas uzturēšanai vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
07Identifikatori
- Atsauce
- Cilvēka smaganu fibroblasti (hGF) (Cytion kataloga numurs 300703)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
08Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā