Prejsť na obsah
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Tkanivo
Gingiva
Synonymá
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Dokumenty

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Číslo výrobku 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Ľudské gingiválne fibroblasty (hGF) sú primárne bunky odvodené zo spojivového tkaniva ďasien v ústnej dutine. Tieto fibroblasty zohrávajú rozhodujúcu úlohu pri udržiavaní štrukturálnej integrity gingiválneho tkaniva tým, že produkujú zložky extracelulárnej matrix vrátane kolagénu, elastínu a glykozaminoglykánov. Ich schopnosť proliferovať a migrovať je nevyhnutná pre hojenie rán, obnovu tkaniva a reakciu na periodontálne ochorenia. Okrem svojich štrukturálnych úloh sa hGF podieľajú na zápalových reakciách v gingíve, pričom interagujú s rôznymi imunitnými bunkami a sprostredkúvajú uvoľňovanie cytokínov a rastových faktorov. To z nich robí kľúčový bunkový model na štúdium zdravia ústnej dutiny, parodontálnych ochorení a regenerácie tkanív.

bunky hGF sa široko využívajú vo výskume zameranom na biológiu ústnej dutiny, najmä pri pochopení patofyziológie ochorení parodontu, kde je významným záujmom interakcia medzi fibroblastami a patogénnymi baktériami, ako je *Porphyromonas gingivalis*. Tieto bunky sa využívajú aj v tkanivovom inžinierstve a regeneratívnej medicíne, najmä pri vývoji terapií defektov ďasien a parodontu. Ich reakcia na rôzne biomateriály, rastové faktory a zložky extracelulárnej matrice sa často študuje s cieľom optimalizovať podmienky na obnovu a regeneráciu tkanív v ústnej chirurgii a zubných implantátoch.

Tkanivo
Gingiva
Aplikácie
Regenerácia tkanív, štúdie hojenia rán
Synonymá
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Darca

Vek darcu
Lot-specific (see CoA)
Etnická príslušnosť
Lot-specific (see CoA)

03Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Špecifické pre danú šaržu
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

04Charakteristiky

Morfológia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Typ bunky
Fibroblasty
Tumorigenický
No

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramov/l inzulínu
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
More than 4,000 cells/cm²
Obnova kvapaliny
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Zotavenie po rozmrazení

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 90 % FBS + 10 % DMSO na udržanie životaschopnosti alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Identifikátory

Citácia
Ľudské gingiválne fibroblasty (hGF) (katalógové číslo Cytion 300703)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606