Tartalomra ugrás
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Szövet
Gingiva
Szinonimák
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Dokumentumok

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Termékszám 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A humán ínyszöveti fibroblasztok (hGF) a szájüregben található gingiva, azaz ínyszövet kötőszövetéből származó elsődleges sejtek. Ezek a fibroblasztok kritikus szerepet játszanak az ínyszövet szerkezeti integritásának fenntartásában azáltal, hogy extracelluláris mátrix komponenseket, többek között kollagént, elasztint és glikozaminoglikánokat termelnek. Proliferációs és migrációs képességük elengedhetetlen a sebgyógyuláshoz, a szövetek helyreállításához és a parodontális betegségekre adott válaszreakcióhoz. Szerkezeti szerepük mellett a hGF részt vesz az ínyen belüli gyulladásos válaszokban, kölcsönhatásba lépve különböző immunsejtekkel és közvetítve a citokinek és növekedési faktorok felszabadulását. Ez teszi őket kulcsfontosságú sejtmodellé a szájüregi egészség, a parodontális betegségek és a szöveti regeneráció tanulmányozásához.

a hGF sejteket széles körben használják a szájbiológiával foglalkozó kutatásokban, különösen a parodontális betegségek patofiziológiájának megértésében, ahol a fibroblasztok és az olyan patogén baktériumok, mint a *Porphyromonas gingivalis* közötti kölcsönhatás jelentős érdeklődésre tart számot. Ezeket a sejteket a szövettechnológia és a regeneratív orvostudomány területén is felhasználják, különösen az íny- és parodontális defektusok terápiáinak kifejlesztésében. A különböző biomaterialokra, növekedési faktorokra és extracelluláris mátrix komponensekre adott válaszukat gyakran tanulmányozzák a szájsebészetben és a fogászati implantátumokban történő szövetjavítás és regeneráció feltételeinek optimalizálása érdekében.

Szövet
Gingiva
Alkalmazások
Szövetregeneráció, Sebgyógyulási vizsgálatok
Szinonimák
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Adományozó

Az adományozó életkora
Lot-specific (see CoA)
Etnikai hovatartozás
Lot-specific (see CoA)

03Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Tétel-specifikus
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

04Jellemzők

Morfológia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Sejttípus
Fibroblasztok
Daganatképző
No

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 10 ng/mL bFGF-fel, 10 mikrogramm/L inzulinnal
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
More than 4,000 cells/cm²
Folyadékcsere
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Az olvadás utáni helyreállás

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Felolvasztás és tenyésztés
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló közegként 90% FBS + 10% DMSO-t használunk az életképesség fenntartásához, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Azonosítók

Hivatkozás
Humán ínyszöveti fibroblasztok (hGF) (Cytion katalógusszám: 300703)
NCBI adóazonosító szám
9606