Přejít na obsah
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Tkáň
Dásně
Synonyma
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Dokumenty

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Číslo výrobku 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Lidské gingivální fibroblasty (hGF) jsou primární buňky odvozené z pojivové tkáně dásní v ústní dutině. Tyto fibroblasty hrají klíčovou roli při udržování strukturální integrity dásňové tkáně tím, že produkují složky extracelulární matrix, včetně kolagenu, elastinu a glykosaminoglykanů. Jejich schopnost proliferace a migrace je nezbytná pro hojení ran, obnovu tkání a reakci na parodontální onemocnění. Kromě své strukturální role se hGF podílejí na zánětlivých reakcích v dásni, interagují s různými imunitními buňkami a zprostředkovávají uvolňování cytokinů a růstových faktorů. To z nich činí klíčový buněčný model pro studium zdraví ústní dutiny, parodontálních onemocnění a regenerace tkání.

buňky hGF se hojně využívají ve výzkumu zaměřeném na biologii dutiny ústní, zejména k pochopení patofyziologie parodontálních onemocnění, kde je významným předmětem zájmu interakce mezi fibroblasty a patogenními bakteriemi, jako je *Porphyromonas gingivalis*. Tyto buňky se také využívají v tkáňovém inženýrství a regenerativní medicíně, zejména při vývoji terapií pro léčbu defektů dásní a parodontu. Často se studuje jejich reakce na různé biomateriály, růstové faktory a složky extracelulární matrix s cílem optimalizovat podmínky pro opravu a regeneraci tkání v ústní chirurgii a zubních implantátech.

Tkáň
Dásně
Aplikace
Regenerace tkání, Studie hojení ran
Synonyma
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Dárce

Věk dárce
Lot-specific (see CoA)
Etnická příslušnost
Lot-specific (see CoA)

03Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Specifické pro danou šarži
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

04Charakteristika

Morfologie
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Typ buňky
Fibroblasty
Tumorogenní
No

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramů/l inzulínu
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
More than 4,000 cells/cm²
Obnova tekutin
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Zotavení po rozmrazení

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Rozmrazování a kultivace
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 90 % FBS + 10 % DMSO pro udržení životaschopnosti nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryokonzervačním procesem.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Identifikátory

Citace
Lidské gingivální fibroblasty (hGF) (katalogové číslo Cytion 300703)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606