Vai al contenuto
Human Gingival Fibroblasts (hGF)
Tessuto
Gengiva
Sinonimi
HGF, HFIB-G, Human fibroblasts, gingiva, provitro 1210412

Documenti

Human Gingival Fibroblasts (hGF)

Primary cell · Codice prodotto 300703

Oral fibroblasts for periodontal and dental research

€650.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Su ordinazione
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

I fibroblasti gengivali umani (hGF) sono cellule primarie derivate dal tessuto connettivo della gengiva, o tessuto gengivale, nella cavità orale. Questi fibroblasti svolgono un ruolo critico nel mantenere l'integrità strutturale del tessuto gengivale producendo componenti della matrice extracellulare, tra cui collagene, elastina e glicosaminoglicani. La loro capacità di proliferare e migrare è essenziale per la guarigione delle ferite, la riparazione dei tessuti e la risposta alla malattia parodontale. Oltre al loro ruolo strutturale, le hGF sono coinvolte nelle risposte infiammatorie all'interno della gengiva, interagendo con varie cellule immunitarie e mediando il rilascio di citochine e fattori di crescita. Ciò le rende un modello cellulare chiave per lo studio della salute orale, della malattia parodontale e della rigenerazione dei tessuti.

le cellule hGF sono ampiamente utilizzate nella ricerca incentrata sulla biologia orale, in particolare nella comprensione della fisiopatologia delle malattie parodontali, dove l'interazione tra i fibroblasti e i batteri patogeni come *Porphyromonas gingivalis* è di notevole interesse. Queste cellule sono utilizzate anche nell'ingegneria tissutale e nella medicina rigenerativa, in particolare nello sviluppo di terapie per i difetti gengivali e parodontali. La loro risposta a diversi biomateriali, fattori di crescita e componenti della matrice extracellulare è spesso studiata per ottimizzare le condizioni di riparazione e rigenerazione dei tessuti in chirurgia orale e negli impianti dentali.

Tessuto
Gengiva
Applicazioni
Rigenerazione dei tessuti, studi sulla guarigione delle ferite
Sinonimi
  • HGF
  • HFIB-G
  • Human fibroblasts
  • gingiva
  • provitro 1210412

02Donatore

Età dei donatori
Lot-specific (see CoA)
Etnia
Lot-specific (see CoA)

03Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Specifico per lotto
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

04Caratteristiche

Morfologia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Tipo di cellula
Fibroblasti
Tumorigenico
No

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, 10 ng/mL bFGF, 10 microgrammi/L di insulina
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
More than 4,000 cells/cm²
Rinnovo dei fluidi
24 hours after seeding, then every 48 to 72 hours
Recupero post-scongelamento

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Scongelamento e coltura
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo FBS al 90% + DMSO al 10% per mantenere la vitalità, oppure CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Identificatori

Riferimento bibliografico
Fibroblasti gengivali umani (hGF) (catalogo Cytion numero 300703)
Codice fiscale NCBI
9606