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Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)
Pañuelo de papel
Médula ósea

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Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)

Cell line · Número de producto 300665

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Bone Marrow (HMSC-BM) represent a robust and versatile tool for in vitro research. These multipotent mesenchymal...

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1

01Información general

Descripción

Las células madre mesenquimales humanas derivadas de la médula ósea (HMSC-BM) representan una herramienta robusta y versátil para la investigación in vitro. Estas células estromales mesenquimales multipotentes (MSC) poseen la capacidad única de autorrenovarse y diferenciarse en una amplia gama de tipos celulares, incluidos adipocitos, osteoblastos y condrocitos. El potencial de las HMSC-BM para diferenciarse en estos tres linajes clave ha sido bien documentado, lo que las hace muy valiosas para estudios centrados en la medicina regenerativa, la ingeniería de tejidos y las vías de diferenciación celular. Estas MSC se cultivan en condiciones estrictas, lo que garantiza su multipotencia y alta viabilidad después de la descongelación.

Una de las características distintivas de las HMSC-BM en comparación con las MSC derivadas de otras fuentes, como el tejido adiposo o el cordón umbilical, es su capacidad superior para la diferenciación osteogénica. Esto las hace especialmente útiles en la biología ósea y la investigación ortopédica, donde es fundamental comprender los mecanismos moleculares que rigen la formación y la reparación ósea. Además, las HMSC-BM presentan un perfil inmunomodulador robusto, lo que las convierte en un modelo excelente para estudiar las interacciones inmunitarias y las respuestas inflamatorias. Estas características únicas también posicionan a las HMSC-BM como la opción preferida para los estudios preclínicos que exploran el microambiente de la médula ósea, la hematopoyesis y la fisiopatología de las enfermedades relacionadas con la médula ósea.

Cada criovial de HMSC-BM contiene un mínimo de 1 x 106 células, con tasas de viabilidad que oscilan entre el 92 % y el 95 %, según lo determinado por la prueba de exclusión con azul de tripano. Estas células se derivan de médula ósea extraída de donantes adultos sanos, todos los cuales han dado su consentimiento informado. Para garantizar los más altos estándares, cada lote se somete a rigurosas pruebas de control de calidad para evaluar la identificación, pureza, potencia y viabilidad de las células. Estas exhaustivas pruebas garantizan que las MSC cumplen criterios estrictos, lo que las hace adecuadas para una amplia gama de aplicaciones de investigación, incluidos estudios de biología celular, descubrimiento de fármacos e investigación de respuestas celulares a diferentes estímulos. Estas células no están destinadas a aplicaciones terapéuticas o in vivo, y su uso se limita a fines de investigación en un entorno de laboratorio controlado.

Pañuelo de papel
Médula ósea
Aplicaciones
Análisis de fármacos, medicina regenerativa, investigación de enfermedades

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Morfología fusiforme y fibroblástica bien extendida durante al menos 5 pases. Menos del 2% de las células muestran una morfología espontánea similar a la de los miofibroblastos en cada pasaje.
Tipo de célula
Células madre

04Identificadores

Referencia
Células madre mesenquimales humanas, médula ósea (HMSC-BM) (número de catálogo Cytion 300665)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
En el análisis de citometría de flujo se utiliza un amplio panel de marcadores, incluidos CD73/CD90/CD105 (positivos) y CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativos), para identificar las CMM cultivadas (P2-P3) antes de la criopreservación. Estos marcadores están recomendados por el comité de MSC del ISCT.
Virus
El donante es negativo para VHB (PCR), Treponema pallidum (PCR) y VIH-1/2 (IFA). Las células son negativas para VHB, VHC, VHS1, VHS2, CMV, VEB, VHH6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum y Ureaplasma parvum.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM alfa, con: 2,0 mM de glutamina estable, sin Ribonucleósidos, w/o: Desoxirribonucleósidos, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2g/L NaHCO3
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Reactivo de disociación
Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C hasta que las células se desprendan (5-10 minutos). Controlar el desprendimiento con un microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Primera renovación de líquidos a las 24 horas, después cada 2 ó 3 días.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos 80% FBS + 10% medio basal + 10% DMSO para mantener la viabilidad, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion) para una crioprotección superior, evitando la diferenciación no deseada y preservando la pluripotencia.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Infórmese
Origen étnico
Caucásico