Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)
Cell line · Número do produto 300665
Human Mesenchymal Stem Cells derived from Bone Marrow (HMSC-BM) represent a robust and versatile tool for in vitro research. These multipotent mesenchymal...
Personalização / Recomendações
- Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)Cell line€690.00
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01Informações gerais
- Descrição
As células estaminais mesenquimais humanas derivadas da medula óssea (HMSC-BM) representam uma ferramenta robusta e versátil para a investigação in vitro. Estas células estromais mesenquimais multipotentes (MSCs) possuem a capacidade única de se auto-renovar e diferenciar num amplo espectro de tipos de células, incluindo adipócitos, osteoblastos e condrócitos. O potencial das HMSC-BM para se diferenciarem nestas três linhagens principais foi bem documentado, tornando-as inestimáveis para estudos focados em medicina regenerativa, engenharia de tecidos e vias de diferenciação celular. Estas MSCs são cultivadas em condições rigorosas, garantindo a sua multipotência e alta viabilidade após o descongelamento.
Uma das características distintivas das HMSC-BM em comparação com as MSCs derivadas de outras fontes, como tecido adiposo ou cordão umbilical, é a sua capacidade superior de diferenciação osteogénica. Isto torna-as particularmente úteis na biologia óssea e na investigação ortopédica, onde é crucial compreender os mecanismos moleculares que regem a formação e reparação óssea. Além disso, as HMSC-BM apresentam um perfil imunomodulador robusto, o que as torna um excelente modelo para o estudo das interações imunitárias e das respostas inflamatórias. Estas características únicas também posicionam as HMSC-BM como a escolha preferida para estudos pré-clínicos que exploram o microambiente da medula óssea, a hematopoiese e a fisiopatologia das doenças relacionadas com a medula óssea.
Cada criovial de HMSC-BM contém um mínimo de 1 x 106 células, com taxas de viabilidade que variam entre 92% e 95%, conforme determinado pelo teste de exclusão com corante azul de tripano. Estas células são derivadas de medula óssea coletada de doadores adultos saudáveis, todos os quais forneceram consentimento informado. Para garantir os mais elevados padrões, cada lote é submetido a rigorosos testes de controlo de qualidade para avaliar a identificação, pureza, potência e viabilidade das células. Estes testes exaustivos garantem que as MSCs cumprem critérios rigorosos, tornando-as adequadas para uma vasta gama de aplicações de investigação, incluindo estudos de biologia celular, descoberta de medicamentos e investigação das respostas celulares a diferentes estímulos. Estas células não se destinam a aplicações terapêuticas ou in vivo, e a sua utilização está limitada a fins de investigação num ambiente laboratorial controlado.
- Tecido
- Medula óssea
- Aplicações
- Teste de medicamentos, medicina regenerativa, investigação de doenças
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Não especificado
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Morfologia fusiforme e semelhante a fibroblastos bem distribuída durante, pelo menos, 5 passagens. Menos de 2% das células exibem morfologia espontânea do tipo miofibroblasto em cada passagem.
- Tipo de célula
- Células estaminais
04Identificadores
- Referência
- Células estaminais mesenquimais humanas, medula óssea (HMSC-BM) (número de catálogo Cytion 300665)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão do antígeno
- Um painel abrangente de marcadores, incluindo CD73/CD90/CD105 (positivo) e CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativo), é utilizado na análise de citometria de fluxo para identificar MSCs cultivadas (P2-P3) antes da criopreservação. Estes marcadores são recomendados pelo comité de MSC da ISCT.
- Vírus
- O dador é negativo para HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) e HIV-1/2 (IFA). As células são negativas para HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum e Ureaplasma parvum.
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- MEM alfa, com: Glutamina estável a 2,0 mM, sem: Ribonucleósidos, s/: Desoxirribonucleósidos, u: 1,0 mM Piruvato de sódio, u: 2,2g/L NaHCO3
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Suplementar o meio com 10% de FBS, 2 ng/mL de bFGF
- Reagente de dissociação
- Tripsina-EDTA
- Subcultura
- Para cultura de rotina de células aderentes: Aspirar o meio de cultura antigo das células aderentes e lavá-las com PBS para remover qualquer meio restante. Depois de aspirar o PBS, adicionar o volume adequado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incubar à temperatura ambiente ou a 37°C até as células se destacarem (5-10 minutos). Monitorizar o desprendimento sob um microscópio e, se necessário, bater suavemente no recipiente para libertar as células. Uma vez desprendidas, adicionar meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspender suavemente as células e transferir uma alíquota da suspensão de células para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Colocar o recipiente numa incubadora regulada para 37°C com 5%de CO2 e mudar o meio a cada 2-3 dias.
- Densidade de sementeira
- 1 a 3 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- Primeira renovação de fluidos após 24 horas, depois a cada 2 ou 3 dias.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos 80% de FBS + 10% de meio basal + 10% de DMSO para manter a viabilidade, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100) para uma crioprotecção superior, prevenindo a diferenciação indesejada e preservando a pluripotência.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- Por favor, pergunte
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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