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Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Tecido
Derme
Sinónimos
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Documentos

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Número do produto 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

Os Fibroblastos Dérmicos Humanos, Adultos (HDF-Ad), são células primárias isoladas da camada da derme da pele humana adulta. Estas células desempenham um papel crucial na fisiologia da pele, sendo responsáveis pela produção de componentes da matriz extracelular, incluindo o colagénio e a elastina, que são essenciais para manter a estrutura e a função da pele. As células HDF-Ad são frequentemente utilizadas na investigação relacionada com a cicatrização de feridas, o envelhecimento e a engenharia de tecidos, dado o seu papel significativo nos processos de reparação e regeneração da pele. Além disso, servem como um modelo importante para estudar o comportamento dos fibroblastos em várias condições e doenças dermatológicas.

As células HDF-Ad são altamente reactivas a estímulos externos, o que as torna uma ferramenta valiosa para investigar as respostas celulares a diferentes factores ambientais, como a radiação UV, o stress oxidativo e vários compostos farmacêuticos. A sua capacidade de proliferar e produzir proteínas essenciais em condições controladas também as torna adequadas para estudos de desenvolvimento de medicamentos, particularmente no contexto de testes de toxicidade e eficácia dérmica. Estas células mantêm muitas das caraterísticas fisiológicas do seu tecido de origem, constituindo um modelo relevante para estudos in vitro destinados a compreender a biologia da pele a nível molecular e celular.

Tecido
Derme
Aplicações
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Sinónimos
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Doador

Idade do dador
Adult
Etnia
Caucasiano

03Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Específico do lote
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

04Características

Morfologia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Tipo de célula
Primary fibroblasts
Tumorigénico
Não

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
MEM, sem ribonucleósidos, sem desoxirribonucleósidos (Não fornecemos este produto; considere outros fornecedores. Por favor, informe-nos se precisar de mais assistência)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 2 ng/mL de hr-bFGF, 2 mM de L-glutamina estável
Reagente de dissociação
Tripsina-EDTA
Subcultura
Para cultura de rotina de células aderentes: Aspirar o meio de cultura antigo das células aderentes e lavá-las com PBS para remover qualquer meio restante. Depois de aspirar o PBS, adicionar o volume adequado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incubar à temperatura ambiente ou a 37°C até as células se destacarem (5-10 minutos). Monitorizar o desprendimento sob um microscópio e, se necessário, bater suavemente no recipiente para libertar as células. Uma vez desprendidas, adicionar meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspender suavemente as células e transferir uma alíquota da suspensão de células para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Colocar o recipiente numa incubadora regulada para 37°C com 5%de CO2 e mudar o meio a cada 2-3 dias.
Densidade de sementeira
1 a 3*103 células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Descongelamento e cultura
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 90% de FBS + 10% de DMSO para manter a viabilidade, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Expressão e suscetibilidade

Antigénios de superfície
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Expressão proteica
Positivo: CD73/CD90/CD105 Negativo: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Vírus
Negativo para: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identificadores

Referência
Fibroblasto dérmico humano, adulto (HDF-Ad) (número de catálogo Cytion 300606)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606