Pāriet uz saturu
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Audums
Derma
Sinonīmi
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumenti

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Preces numurs 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Pieauguša cilvēka ādas fibroblasti (HDF-Ad) ir primārās šūnas, kas izolētas no pieauguša cilvēka ādas dermas slāņa. Šīm šūnām ir izšķiroša nozīme ādas fizioloģijā, jo tās ir atbildīgas par ekstracelulārā matriksa komponentu, tostarp kolagēna un elastīna, ražošanu, kas ir būtiski svarīgi ādas struktūras un funkcijas uzturēšanai. HDF-Ad šūnas bieži izmanto pētījumos, kas saistīti ar brūču dzīšanu, novecošanu un audu inženieriju, ņemot vērā to nozīmīgo lomu ādas atjaunošanas un reģenerācijas procesos. Turklāt tās kalpo kā svarīgs modelis fibroblastu uzvedības izpētei dažādu dermatoloģisku stāvokļu un slimību gadījumā.

HDF-Ad šūnas ir ļoti jutīgas pret ārējiem stimuliem, padarot tās par vērtīgu līdzekli, lai pētītu šūnu reakciju uz dažādiem vides faktoriem, piemēram, UV starojumu, oksidatīvo stresu un dažādiem farmaceitiskiem savienojumiem. To spēja kontrolētos apstākļos proliferēt un ražot būtiskus proteīnus arī padara tās piemērotas zāļu izstrādes pētījumiem, jo īpaši saistībā ar ādas toksicitātes un efektivitātes testēšanu. Šīs šūnas saglabā daudzas fizioloģiskās īpašības, kas raksturīgas to izcelsmes audiem, tādējādi nodrošinot piemērotu modeli in vitro pētījumiem, kuru mērķis ir izprast ādas bioloģiju molekulārā un šūnu līmenī.

Audums
Derma
Pieteikumi
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Sinonīmi
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Ziedotājs

Donora vecums
Adult
Etniskā piederība
Kaukāzietis

03Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Atkarībā no partijas
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

04Raksturlielumi

Morfoloģija
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Šūnu tips
Primary fibroblasts
Tumorogēns
Nē

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
MEM, bez ribonukleozīdiem, bez dezoksiribonukleozīdiem (Mēs nepiegādājam šo produktu; lūdzu, apsveriet citus piegādātājus. Lūdzu, informējiet mūs, ja jums nepieciešama papildu palīdzība)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilā L-glutamīna
Disociācijas reaģents
Tripsīns-EDTA
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu atkarībā no kultūras trauka lieluma (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai) un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C, līdz šūnas atdalās (5-10 minūtes). Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3*103 šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Atkausēšana un kultivēšana
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 90 % FBS + 10 % DMSO dzīvotspējas uzturēšanai vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Pazīmes un uzņēmība

Virsmas antigēni
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Proteīnu ekspresija
Pozitīvi: CD73/CD90/CD105 Negatīvs: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Vīrusi
Negatīvs par: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identifikatori

Atsauce
Cilvēka ādas fibroblasts, pieaugušais (HDF-Ad) (Cytion kataloga numurs 300606)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606