
- Væv
- Dermis
- Synonymer
- NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411
Dokumenter
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Primary cell · Varenummer 300606
Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research
Tilpasning / Anbefalinger
- Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)Primary cell€490.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
Humane dermale fibroblaster, voksne (HDF-Ad), er primære celler, der er isoleret fra dermis-laget i voksen menneskehud. Disse celler spiller en afgørende rolle i hudens fysiologi, idet de er ansvarlige for produktionen af ekstracellulære matrixkomponenter, herunder kollagen og elastin, som er afgørende for at opretholde hudens struktur og funktion. HDF-Ad-celler bruges ofte i forskning relateret til sårheling, aldring og vævsteknik på grund af deres vigtige rolle i hudens reparations- og regenereringsprocesser. Derudover fungerer de som en vigtig model til at studere fibroblasters adfærd ved forskellige dermatologiske tilstande og sygdomme.
HDF-Ad-celler er meget lydhøre over for eksterne stimuli, hvilket gør dem til et værdifuldt værktøj til at undersøge de cellulære reaktioner på forskellige miljøfaktorer som UV-stråling, oxidativ stress og forskellige farmaceutiske forbindelser. Deres evne til at sprede sig og producere vigtige proteiner under kontrollerede forhold gør dem også velegnede til undersøgelser inden for lægemiddeludvikling, især i forbindelse med test af dermal toksicitet og effekt. Disse celler bevarer mange af de fysiologiske egenskaber ved deres oprindelsesvæv, hvilket giver en relevant model til in vitro-undersøgelser, der har til formål at forstå hudens biologi på molekylært og cellulært niveau.
- Væv
- Dermis
- Anvendelser
- UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
- Synonymer
- NHDF-Ad
- HFIB-D
- Human fibroblasts
- dermis adult
- provitro 1210411
02Donor
- Donorens alder
- Adult
- Etnisk tilhørsforhold
- Kaukasisk
03Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Partispecifik
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
04Egenskaber
- Morfologi
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Celletype
- Primary fibroblasts
- Tumorfremkaldende
- Nej
05Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- MEM, uden ribonukleosider, uden deoxyribonukleosider (Vi leverer ikke dette produkt; overvej venligst andre leverandører. Lad os vide, hvis du har brug for yderligere hjælp)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabil L-glutamin
- Dissociationsreagens
- Trypsin-EDTA
- Oddyrkning
- Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
- Såtæthed
- 1 til 3*103 celler/cm²
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Optøning og dyrkning
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi 90 % FBS + 10 % DMSO for at opretholde levedygtigheden eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
07Udtryk og modtagelighed
- Overfladeantigener
- CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
- Proteinekspression
- Positiv: CD73/CD90/CD105 Negativ: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
- Vira
- Negativ for: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum
08Identifikatorer
- Kildehenvisning
- Human dermal fibroblast, voksen (HDF-Ad) (Cytion katalognummer 300606)
- NCBI-skattenummer
- 9606
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja