Gå direkte til indholdet
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Væv
Dermis
Synonymer
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumenter

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Varenummer 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Humane dermale fibroblaster, voksne (HDF-Ad), er primære celler, der er isoleret fra dermis-laget i voksen menneskehud. Disse celler spiller en afgørende rolle i hudens fysiologi, idet de er ansvarlige for produktionen af ekstracellulære matrixkomponenter, herunder kollagen og elastin, som er afgørende for at opretholde hudens struktur og funktion. HDF-Ad-celler bruges ofte i forskning relateret til sårheling, aldring og vævsteknik på grund af deres vigtige rolle i hudens reparations- og regenereringsprocesser. Derudover fungerer de som en vigtig model til at studere fibroblasters adfærd ved forskellige dermatologiske tilstande og sygdomme.

HDF-Ad-celler er meget lydhøre over for eksterne stimuli, hvilket gør dem til et værdifuldt værktøj til at undersøge de cellulære reaktioner på forskellige miljøfaktorer som UV-stråling, oxidativ stress og forskellige farmaceutiske forbindelser. Deres evne til at sprede sig og producere vigtige proteiner under kontrollerede forhold gør dem også velegnede til undersøgelser inden for lægemiddeludvikling, især i forbindelse med test af dermal toksicitet og effekt. Disse celler bevarer mange af de fysiologiske egenskaber ved deres oprindelsesvæv, hvilket giver en relevant model til in vitro-undersøgelser, der har til formål at forstå hudens biologi på molekylært og cellulært niveau.

Væv
Dermis
Anvendelser
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Synonymer
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Donor

Donorens alder
Adult
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk

03Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Partispecifik
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

04Egenskaber

Morfologi
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Celletype
Primary fibroblasts
Tumorfremkaldende
Nej

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
MEM, uden ribonukleosider, uden deoxyribonukleosider (Vi leverer ikke dette produkt; overvej venligst andre leverandører. Lad os vide, hvis du har brug for yderligere hjælp)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabil L-glutamin
Dissociationsreagens
Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Såtæthed
1 til 3*103 celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Optøning og dyrkning
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 90 % FBS + 10 % DMSO for at opretholde levedygtigheden eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Udtryk og modtagelighed

Overfladeantigener
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Proteinekspression
Positiv: CD73/CD90/CD105 Negativ: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Vira
Negativ for: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identifikatorer

Kildehenvisning
Human dermal fibroblast, voksen (HDF-Ad) (Cytion katalognummer 300606)
NCBI-skattenummer
9606