Preskoči na vsebino
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Tkivo
Dermis
Sinonimi
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumenti

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Številka izdelka 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Človeški dermalni fibroblasti, odrasli (HDF-Ad), so primarne celice, izolirane iz dermisa odrasle človeške kože. Te celice imajo ključno vlogo v fiziologiji kože, saj so odgovorne za proizvodnjo sestavin zunajceličnega matriksa, vključno s kolagenom in elastinom, ki sta bistvena za ohranjanje strukture in delovanja kože. Celice HDF-Ad se pogosto uporabljajo v raziskavah, povezanih z celjenjem ran, staranjem in tkivnim inženirstvom, saj imajo pomembno vlogo pri popravljanju in regeneraciji kože. Poleg tega so pomemben model za preučevanje obnašanja fibroblastov pri različnih dermatoloških stanjih in boleznih.

Celice HDF-Ad so zelo odzivne na zunanje dražljaje, zato so dragoceno orodje za raziskovanje celičnih odzivov na različne okoljske dejavnike, kot so UV sevanje, oksidativni stres in različne farmacevtske spojine. Zaradi njihove sposobnosti razmnoževanja in proizvajanja bistvenih beljakovin v nadzorovanih pogojih so primerne tudi za študije pri razvoju zdravil, zlasti v okviru testiranja dermalne toksičnosti in učinkovitosti. Te celice ohranijo številne fiziološke značilnosti svojega izvornega tkiva, kar zagotavlja ustrezen model za študije in vitro, namenjene razumevanju biologije kože na molekularni in celični ravni.

Tkivo
Dermis
Uporaba
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Sinonimi
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Donator

Starost darovalca
Adult
Etnična pripadnost
Kavkaški

03Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Posebno za posamezno serijo
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

04Značilnosti

Morfologija
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Vrsta celice
Primary fibroblasts
Tumorigeničen
Ne

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
MEM, brez ribonukleozidov, brez deoksiribonukleozidov (Tega izdelka ne dobavljamo; prosimo, upoštevajte druge dobavitelje. Če potrebujete dodatno pomoč, nam to sporočite)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilnega L-glutamina
Reagenca za disociacijo
Tripsin-EDTA
Preusmeritev v drugo kulturo
Za rutinsko gojenje adherentnih celic: Iz adherentnih celic odsesajte staro gojišče in jih sperite s PBS, da odstranite preostalo gojišče. Po odsesanju PBS dodajte ustrezno količino raztopine tripsina/EDTA glede na velikost posode za gojenje (npr. 1 ml za bučko T25, 3 ml za bučko T75) in inkubirajte pri sobni temperaturi ali 37 °C, dokler se celice ne ločijo (5-10 minut). Odlepitev spremljajte pod mikroskopom in po potrebi nežno potrkajte posodo, da se celice sprostijo. Ko se celice odcepijo, dodajte popolno gojišče za inaktivacijo tripsina/EDTA, nežno ponovno suspendirajte celice in prenesite alikvot celične suspenzije v novo posodo za gojenje s svežim gojiščem. Posodo postavite v inkubator, nastavljen na 37 °C s 5 %CO2, in gojišče zamenjajte vsake 2 do 3 dni.
Gostota setve
1 do 3*103 celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Odtaljevanje in gojenje
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 90 % FBS + 10 % DMSO za ohranjanje viabilnosti ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Izražanje in dovzetnost

Površinski antigeni
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Ekspresija beljakovin
Pozitivno: CD73/CD90/CD105 Negativno: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Virusi
Negativno za: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identifikatorji

Navajanje vira
Človeški kožni fibroblast, odrasel (HDF-Ad) (kataloška številka 300606 podjetja Cytion)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606