الانتقال إلى المحتوى
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
الأنسجة
الأدمة
المرادفات
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

المستندات

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · رقم المنتج 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخلايا الليفية الجلدية الجلدية البشرية، البالغة (HDF-Ad)، هي خلايا أولية معزولة من طبقة الأدمة في جلد الإنسان البالغ. تلعب هذه الخلايا دوراً حاسماً في فسيولوجيا الجلد، فهي مسؤولة عن إنتاج مكونات المصفوفة خارج الخلية، بما في ذلك الكولاجين والإيلاستين، وهي ضرورية للحفاظ على بنية الجلد ووظيفته. وكثيراً ما تُستخدم خلايا HDF-Ad في الأبحاث المتعلقة بالتئام الجروح والشيخوخة وهندسة الأنسجة، نظراً لدورها الهام في عمليات إصلاح الجلد وتجديده. بالإضافة إلى ذلك، تُستخدم هذه الخلايا كنموذج مهم لدراسة سلوك الخلايا الليفية في مختلف الحالات والأمراض الجلدية.

تتميز خلايا HDF-Ad باستجابتها العالية للمحفزات الخارجية، مما يجعلها أداة قيّمة لدراسة الاستجابات الخلوية للعوامل البيئية المختلفة مثل الأشعة فوق البنفسجية والإجهاد التأكسدي والمركبات الدوائية المختلفة. كما أن قدرة هذه الخلايا على التكاثر وإنتاج البروتينات الأساسية في ظل ظروف خاضعة للرقابة تجعلها مناسبة للدراسات في مجال تطوير الأدوية، خاصة في سياق اختبار السمية الجلدية والفعالية. تحتفظ هذه الخلايا بالعديد من الخصائص الفسيولوجية لأنسجتها الأصلية، مما يوفر نموذجاً مناسباً للدراسات المختبرية التي تهدف إلى فهم بيولوجيا الجلد على المستويين الجزيئي والخلوي.

الأنسجة
الأدمة
التطبيقات
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
المرادفات
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02المانح

عمر المتبرع
Adult
الأصل العرقي
قوقازي

03التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
خاص بالقطعة
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

04الخصائص

المورفولوجيا
Spindle-shaped (fibroblast-like)
نوع الخلية
Primary fibroblasts
مُسبِّب للأورام
لا يوجد

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
MEM، بدون ريبونوكليوسيدات، بدون ديوكسي ريبونوكليوسيدات (نحن لا نوفر هذا المنتج؛ يُرجى النظر في موردين آخرين. يرجى إعلامنا إذا كنت بحاجة إلى مزيد من المساعدة)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و2 نانوغرام/ملل من عامل النمو الهرموني، و2 ملي مولار مليغرام من الجلوتامين المستقر L-غلوتامين
كاشف التفكك
التربسين-إدتا
إعادة الاستنبات
لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/إيدتا بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية حتى تنفصل الخلايا (5-10 دقائق). راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطًا كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مستنبت جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
كثافة البذر
1 إلى 3*103 خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

إذابة الثلج والزراعة
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 90% FBS + 10% DMSO للحفاظ على الحيوية أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07التعبير والقابلية للإصابة

المستضدات السطحية
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
التعبير البروتيني
موجب: CD73/CD90/CD105 سلبي: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
الفيروسات
سلبي لـ: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08المعرّفات

المرجع
الخلايا الليفية الجلدية الجلدية البشرية، للبالغين (HDF-Ad) (كتالوج سيتيون رقم 300606)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606