Ga naar de inhoud
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Weefsel
Lederhuid
Synoniemen
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Documenten

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Productnummer 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Human Dermal Fibroblasts, Adult (HDF-Ad), zijn primaire cellen geïsoleerd uit de dermislaag van de volwassen menselijke huid. Deze cellen spelen een cruciale rol in de fysiologie van de huid, omdat ze verantwoordelijk zijn voor de productie van extracellulaire matrixcomponenten, waaronder collageen en elastine, die essentieel zijn voor het behoud van de huidstructuur en -functie. HDF-Ad cellen worden vaak gebruikt in onderzoek naar wondgenezing, veroudering en tissue engineering, gezien hun belangrijke rol in huidherstel en regeneratieprocessen. Daarnaast dienen ze als een belangrijk model voor het bestuderen van het gedrag van fibroblasten bij verschillende dermatologische aandoeningen en ziekten.

HDF-Ad cellen zijn zeer gevoelig voor externe prikkels, waardoor ze een waardevol instrument zijn voor het onderzoeken van de cellulaire reacties op verschillende omgevingsfactoren zoals UV-straling, oxidatieve stress en verschillende farmaceutische verbindingen. Hun vermogen om zich te vermenigvuldigen en essentiële eiwitten te produceren onder gecontroleerde omstandigheden maakt ze ook geschikt voor onderzoek naar de ontwikkeling van geneesmiddelen, met name in de context van huidtoxiciteit en werkzaamheidstesten. Deze cellen behouden veel van de fysiologische eigenschappen van hun weefsel van oorsprong, waardoor ze een relevant model vormen voor in vitro studies om de huidbiologie op moleculair en cellulair niveau te begrijpen.

Weefsel
Lederhuid
Toepassingen
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Synoniemen
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Donateur

Leeftijd van de donor
Adult
Etnische afkomst
Kaukasisch

03Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Lot-specifiek
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

04Kenmerken

Morfologie
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Celtype
Primary fibroblasts
Tumorverwekkend
Geen

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
MEM, zonder ribonucleosiden, zonder desoxyribonucleosiden (Wij leveren dit product niet; overweeg andere leveranciers. Laat het ons weten als u meer hulp nodig hebt)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 2 ng/mL hr-bFGF, 2 mM stabiele L-glutamine
Dissociatiereagens
Trypsine-EDTA
Heruitplanten
Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C totdat de cellen loskomen (5-10 minuten). Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
Zaaidichtheid
1 tot 3*103 cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Ontdooien en kweken
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 90% FBS + 10% DMSO om de levensvatbaarheid te behouden, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Eiwit-expressie
Positief: CD73/CD90/CD105 Negatief: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Virussen
Negatief voor: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identificatiegegevens

Bronvermelding
Menselijke huidfibroblast, volwassen (HDF-Ad) (Cytion catalogusnummer 300606)
NCBI-belastingnummer
9606