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Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Pañuelo de papel
Dermis
Sinónimos
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Documentos

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Número de producto 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

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1

01Información general

Descripción

Los Fibroblastos Dérmicos Humanos, Adultos (HDF-Ad), son células primarias aisladas de la capa de la dermis de la piel humana adulta. Estas células desempeñan un papel crucial en la fisiología de la piel, ya que son responsables de la producción de componentes de la matriz extracelular, incluidos el colágeno y la elastina, que son esenciales para mantener la estructura y la función de la piel. Las células HDF-Ad se utilizan con frecuencia en investigaciones relacionadas con la cicatrización de heridas, el envejecimiento y la ingeniería de tejidos, dado su importante papel en los procesos de reparación y regeneración de la piel. Además, constituyen un modelo importante para estudiar el comportamiento de los fibroblastos en diversas afecciones y enfermedades dermatológicas.

Las células HDF-Ad son muy sensibles a los estímulos externos, lo que las convierte en una valiosa herramienta para investigar las respuestas celulares a distintos factores ambientales, como la radiación UV, el estrés oxidativo y diversos compuestos farmacéuticos. Su capacidad para proliferar y producir proteínas esenciales en condiciones controladas también las hace adecuadas para estudios de desarrollo de fármacos, especialmente en el contexto de las pruebas de toxicidad y eficacia dérmicas. Estas células conservan muchas de las características fisiológicas de su tejido de origen, por lo que constituyen un modelo pertinente para los estudios in vitro destinados a comprender la biología de la piel a nivel molecular y celular.

Pañuelo de papel
Dermis
Aplicaciones
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Sinónimos
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Donante

Edad del donante
Adult
Origen étnico
Caucásico

03Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Específico de cada lote
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

04Características

Morfología
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Tipo de célula
Primary fibroblasts
Tumorigénico
No

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM, sin ribonucleósidos, sin desoxirribonucleósidos (No suministramos este producto; considere otros proveedores. Háganos saber si necesita más ayuda)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 2 ng/mL hr-bFGF, 2 mM de L-glutamina estable
Reactivo de disociación
Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C hasta que las células se desprendan (5-10 minutos). Controlar el desprendimiento con un microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10³ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Descongelación y cultivo

  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos FBS al 90% + DMSO al 10% para mantener la viabilidad, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Expresión y susceptibilidad

Antígenos de superficie
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Expresión de proteínas
Positivos: CD73/CD90/CD105 Negativo: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Virus
Negativo para: VIH-1/2, VHB, VHC, VHS1/2, CMV, VEB, VHH6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identificadores

Referencia
Fibroblasto dérmico humano, adulto (HDF-Ad) (Cytion número de catálogo 300606)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606