Tartalomra ugrás
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Szövet
Dermis
Szinonimák
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumentumok

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Termékszám 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A humán bőrfibroblasztok, felnőtt (HDF-Ad) a felnőtt emberi bőr dermisz rétegéből izolált primer sejtek. Ezek a sejtek döntő szerepet játszanak a bőr fiziológiájában, mivel felelősek az extracelluláris mátrix összetevőinek, köztük a kollagénnek és az elasztinnak a termeléséért, amelyek nélkülözhetetlenek a bőr szerkezetének és működésének fenntartásához. A HDF-Ad sejteket gyakran használják a sebgyógyulással, az öregedéssel és a szövetszerkesztéssel kapcsolatos kutatásokban, mivel jelentős szerepet játszanak a bőr javítási és regenerációs folyamataiban. Emellett fontos modellként szolgálnak a fibroblasztok viselkedésének tanulmányozásához különböző bőrgyógyászati állapotokban és betegségekben.

A HDF-Ad sejtek rendkívül érzékenyek a külső ingerekre, így értékes eszközzé válnak a különböző környezeti tényezőkre, például UV-sugárzásra, oxidatív stresszre és különböző gyógyszeripari vegyületekre adott sejtválaszok vizsgálatára. Az a képességük, hogy kontrollált körülmények között képesek szaporodni és alapvető fehérjéket termelni, szintén alkalmassá teszi őket a gyógyszerfejlesztés vizsgálatára, különösen a bőrön keresztüli toxicitás és hatékonyság vizsgálatának összefüggésében. Ezek a sejtek megőrzik származási szövetük számos fiziológiai jellemzőjét, és megfelelő modellt biztosítanak a bőr biológiájának molekuláris és sejtszintű megértését célzó in vitro vizsgálatokhoz.

Szövet
Dermis
Alkalmazások
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Szinonimák
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Adományozó

Az adományozó életkora
Adult
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi

03Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Tétel-specifikus
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

04Jellemzők

Morfológia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Sejttípus
Primary fibroblasts
Daganatképző
Nem

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
MEM, ribonukleozidok nélkül, dezoxiribonukleozidok nélkül (Ezt a terméket nem szállítjuk; kérjük, vegyen figyelembe más beszállítókat. Kérjük, jelezze, ha további segítségre van szüksége)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 2 ng/mL hr-bFGF-fel, 2 mM stabil L-glutaminnal
Diszociációs reagens
Trypsin-EDTA
Átültetés
Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjunk hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű tripszin/EDTA-oldatot (pl. 1 ml T25 lombikhoz, 3 ml T75 lombikhoz), és inkubáljuk szobahőmérsékleten vagy 37°C-on, amíg a sejtek leválnak (5-10 perc). Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek kiszabadításához. Ha a sejtek leváltak, adjunk hozzá teljes tápfolyadékot a tripszin/EDTA inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
Ültetési sűrűség
1–3*103 sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Felolvasztás és tenyésztés
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló közegként 90% FBS + 10% DMSO-t használunk az életképesség fenntartásához, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Kifejeződés és fogékonyság

Felszíni antigének
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Fehérjeexpresszió
Pozitív: CD73/CD90/CD105 Negatív: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Vírusok
Negatív: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Azonosítók

Hivatkozás
Humán bőr fibroblaszt, felnőtt (HDF-Ad) (Cytion katalógusszám: 300606)
NCBI adóazonosító szám
9606