
- Szövet
- Dermis
- Szinonimák
- NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411
Dokumentumok
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Primary cell · Termékszám 300606
Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research
Személyre szabás / Ajánlások
- Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)Primary cell€490.00
01Általános információk
- Leírás
A humán bőrfibroblasztok, felnőtt (HDF-Ad) a felnőtt emberi bőr dermisz rétegéből izolált primer sejtek. Ezek a sejtek döntő szerepet játszanak a bőr fiziológiájában, mivel felelősek az extracelluláris mátrix összetevőinek, köztük a kollagénnek és az elasztinnak a termeléséért, amelyek nélkülözhetetlenek a bőr szerkezetének és működésének fenntartásához. A HDF-Ad sejteket gyakran használják a sebgyógyulással, az öregedéssel és a szövetszerkesztéssel kapcsolatos kutatásokban, mivel jelentős szerepet játszanak a bőr javítási és regenerációs folyamataiban. Emellett fontos modellként szolgálnak a fibroblasztok viselkedésének tanulmányozásához különböző bőrgyógyászati állapotokban és betegségekben.
A HDF-Ad sejtek rendkívül érzékenyek a külső ingerekre, így értékes eszközzé válnak a különböző környezeti tényezőkre, például UV-sugárzásra, oxidatív stresszre és különböző gyógyszeripari vegyületekre adott sejtválaszok vizsgálatára. Az a képességük, hogy kontrollált körülmények között képesek szaporodni és alapvető fehérjéket termelni, szintén alkalmassá teszi őket a gyógyszerfejlesztés vizsgálatára, különösen a bőrön keresztüli toxicitás és hatékonyság vizsgálatának összefüggésében. Ezek a sejtek megőrzik származási szövetük számos fiziológiai jellemzőjét, és megfelelő modellt biztosítanak a bőr biológiájának molekuláris és sejtszintű megértését célzó in vitro vizsgálatokhoz.
- Szövet
- Dermis
- Alkalmazások
- UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
- Szinonimák
- NHDF-Ad
- HFIB-D
- Human fibroblasts
- dermis adult
- provitro 1210411
02Adományozó
- Az adományozó életkora
- Adult
- Etnikai hovatartozás
- Kaukázusi
03Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Tétel-specifikus
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
04Jellemzők
- Morfológia
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Sejttípus
- Primary fibroblasts
- Daganatképző
- Nem
05Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- MEM, ribonukleozidok nélkül, dezoxiribonukleozidok nélkül (Ezt a terméket nem szállítjuk; kérjük, vegyen figyelembe más beszállítókat. Kérjük, jelezze, ha további segítségre van szüksége)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 2 ng/mL hr-bFGF-fel, 2 mM stabil L-glutaminnal
- Diszociációs reagens
- Trypsin-EDTA
- Átültetés
- Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjunk hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű tripszin/EDTA-oldatot (pl. 1 ml T25 lombikhoz, 3 ml T75 lombikhoz), és inkubáljuk szobahőmérsékleten vagy 37°C-on, amíg a sejtek leválnak (5-10 perc). Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek kiszabadításához. Ha a sejtek leváltak, adjunk hozzá teljes tápfolyadékot a tripszin/EDTA inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
- Ültetési sűrűség
- 1–3*103 sejt/cm²
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Felolvasztás és tenyésztés
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló közegként 90% FBS + 10% DMSO-t használunk az életképesség fenntartásához, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
07Kifejeződés és fogékonyság
- Felszíni antigének
- CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
- Fehérjeexpresszió
- Pozitív: CD73/CD90/CD105 Negatív: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
- Vírusok
- Negatív: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum
08Azonosítók
- Hivatkozás
- Humán bőr fibroblaszt, felnőtt (HDF-Ad) (Cytion katalógusszám: 300606)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen