Mine otse sisu juurde
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Kude
Dermis
Sünonüümid
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumendid

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Toote number 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese täiskasvanud nahafibroblastid (HDF-Ad) on täiskasvanud inimese naha nahakihist isoleeritud primaarsed rakud. Need rakud mängivad olulist rolli naha füsioloogias, vastutades rakuvälise maatriksi komponentide, sealhulgas kollageeni ja elastiini tootmise eest, mis on olulised naha struktuuri ja funktsiooni säilitamiseks. HDF-Ad rakke kasutatakse sageli haavade paranemise, vananemise ja koetehnoloogia uuringutes, arvestades nende olulist rolli naha taastumis- ja regenereerimisprotsessides. Lisaks on nad oluline mudel fibroblastide käitumise uurimiseks erinevate dermatoloogiliste seisundite ja haiguste korral.

HDF-Ad rakud reageerivad väga hästi välistele stiimulitele, mis teeb neist väärtusliku vahendi rakkude reaktsioonide uurimiseks erinevatele keskkonnateguritele, nagu UV-kiirgus, oksüdatiivne stress ja mitmesugused farmatseutilised ühendid. Nende võime paljuneda ja toota olulisi valke kontrollitud tingimustes muudab nad sobivaks ka ravimite väljatöötamise uuringuteks, eriti nahatoksilisuse ja tõhususe testimise kontekstis. Need rakud säilitavad paljud oma päritolukoe füsioloogilised omadused, pakkudes asjakohast mudelit in vitro uuringuteks, mille eesmärk on mõista naha bioloogiat molekulaar- ja rakutasandil.

Kude
Dermis
Rakendused
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Sünonüümid
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Annetaja

Doonori vanus
Adult
Etniline kuuluvus
Kaukaasia

03Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Kogupõhine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

04Omadused

Morfoloogia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Rakutüüp
Primary fibroblasts
Tuumorigeenne
Ei

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
MEM, ilma ribonukleosiidide, ilma desoksüribonukleosiidita (Me ei paku seda toodet; palun kaaluge teisi tarnijaid. Palun andke meile teada, kui vajate täiendavat abi)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabiilse L-glutamiiniga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Trypsin-EDTA
Kultuuri edasikasvatamine
Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37 °C, kuni rakud eralduvad (5-10 minutit). Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kasvatusanumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
Külvitihedus
1 kuni 3*103 rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Sulatamine ja kasvatamine
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimise keskkonda kasutame 90% FBS + 10% DMSO elujõulisuse säilitamiseks või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pinnaantigeenid
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Valgu ekspressioon
Positiivne: CD73/CD90/CD105 Negatiivne: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Viirused
Negatiivne: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Tunnused

Viide
Inimese nahafibroblast, täiskasvanud (HDF-Ad) (Cytioni katalooginumber 300606)
NCBI maksukood
9606