Skip to content
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Tissue
เดอร์มิส
Synonyms
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Documents

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Product number 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

ไฟโบรบลาสต์ผิวหนังมนุษย์ผู้ใหญ่ (HDF-Ad) เป็นเซลล์ปฐมภูมิที่แยกได้จากชั้นหนังแท้ของผิวหนังมนุษย์ผู้ใหญ่ เซลล์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในสรีรวิทยาของผิวหนัง โดยรับผิดชอบในการผลิตองค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ ซึ่งรวมถึงคอลลาเจนและอีลาสติน ซึ่งเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการรักษาโครงสร้างและการทำงานของผิวหนังเซลล์ HDF-Ad ถูกนำมาใช้บ่อยในงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับการหายของแผล, การแก่, และการวิศวกรรมเนื้อเยื่อ เนื่องจากบทบาทที่สำคัญของพวกมันในกระบวนการซ่อมแซมและฟื้นฟูผิวหนัง นอกจากนี้ พวกมันยังเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาพฤติกรรมของไฟโบรบลาสต์ในภาวะผิวหนังต่าง ๆ และโรคต่าง ๆ

เซลล์ HDF-Ad มีความไวสูงต่อสิ่งกระตุ้นจากภายนอก ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาการตอบสนองของเซลล์ต่อปัจจัยแวดล้อมต่างๆ เช่น รังสี UV ความเครียดออกซิเดชัน และสารประกอบทางเภสัชกรรมต่างๆ ความสามารถในการเพิ่มจำนวนและผลิตโปรตีนที่จำเป็นภายใต้สภาวะที่ควบคุมได้ ยังทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมสำหรับการศึกษาในการพัฒนายา โดยเฉพาะในบริบทของการทดสอบความเป็นพิษต่อผิวหนังและประสิทธิภาพเซลล์เหล่านี้ยังคงลักษณะทางสรีรวิทยาหลายประการของเนื้อเยื่อต้นกำเนิดไว้ ซึ่งทำให้เป็นแบบจำลองที่เกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาในหลอดทดลองที่มีเป้าหมายเพื่อเข้าใจชีววิทยาของผิวหนังในระดับโมเลกุลและเซลล์

Tissue
เดอร์มิส
Applications
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Synonyms
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Donor

Donor age
Adult
Ethnicity
คอเคเชียน

03Classification

Organism
Human
Sex
Lot-specific
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

04Characteristics

Morphology
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Cell type
Primary fibroblasts
Tumourigenic
ไม่

05Handling and culture

Culture medium
MEM, ไม่มีไรโบนิวคลีโอไซด์, ไม่มีดีออกซีไรโบนิวคลีโอไซด์ (เราไม่จัดจำหน่ายผลิตภัณฑ์นี้ กรุณาพิจารณาผู้จัดจำหน่ายรายอื่น หากต้องการความช่วยเหลือเพิ่มเติม กรุณาแจ้งให้เราทราบ)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, hr-bFGF 2 นาโนกรัมต่อมิลลิลิตร, และ L-glutamine ที่เสถียร 2 มิลลิโมลาร์
Dissociation reagent
ทริปซิน-เอดทีเอ
Subculturing
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เกาะติดแบบปกติ: ดูดสกัดน้ำเลี้ยงเก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติด และล้างเซลล์ด้วย PBS เพื่อกำจัดน้ำเลี้ยงที่เหลืออยู่หลังจากดูด PBS ออกแล้ว ให้เติมสารละลาย Trypsin/EDTA ในปริมาณที่เหมาะสมตามขนาดของภาชนะเพาะเลี้ยง (เช่น 1 มล. สำหรับขวด T25, 3 มล. สำหรับขวด T75) และทำการบ่มที่อุณหภูมิห้องหรือ 37°C จนเซลล์หลุดออกจากผนัง (ประมาณ 5-10 นาที)สังเกตการหลุดของเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และเคาะภาชนะเบา ๆ หากจำเป็นเพื่อปล่อยเซลล์ เมื่อเซลล์หลุดออกแล้ว ให้เติมอาหารเลี้ยงเซลล์แบบครบถ้วนเพื่อหยุดการทำงานของ Trypsin/EDTA คนเซลล์ให้กระจายตัวอย่างเบามือ แล้วแบ่งตัวอย่างเซลล์ที่แขวนลอยใส่ลงในภาชนะเพาะเลี้ยงใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด วางภาชนะในตู้อบที่ตั้งอุณหภูมิไว้ที่ 37°Cพร้อมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% และเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2-3 วัน
Seeding density
1 ถึง 3*10^3 เซลล์/ซม.²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Thawing and culturing

  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ FBS 90% + DMSO 10% เพื่อรักษาความมีชีวิต หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Expression and susceptibility

Surface antigens
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Protein expression
บวก: CD73/CD90/CD105 ลบ: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Viruses
ไม่พบ: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identifiers

Citation
ไฟโบรบลาสต์ผิวหนังมนุษย์ผู้ใหญ่ (HDF-Ad) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300606)
NCBI TaxID
9606