Перейти до вмісту
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Тканина
Дерма
Синоніми
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Документи

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Номер товару 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Дорослі фібробласти дерми людини (HDF-Ad) - це первинні клітини, виділені з шару дерми шкіри дорослої людини. Ці клітини відіграють важливу роль у фізіології шкіри, відповідаючи за вироблення компонентів позаклітинного матриксу, включаючи колаген та еластин, які необхідні для підтримки структури та функції шкіри. Клітини HDF-Ad часто використовуються в дослідженнях, пов'язаних із загоєнням ран, старінням і тканинною інженерією, враховуючи їх важливу роль у процесах відновлення та регенерації шкіри. Крім того, вони слугують важливою моделлю для вивчення поведінки фібробластів при різних дерматологічних станах і захворюваннях.

Клітини HDF-Ad дуже чутливі до зовнішніх подразників, що робить їх цінним інструментом для дослідження клітинних реакцій на різні фактори навколишнього середовища, такі як УФ-випромінювання, окислювальний стрес і різні фармацевтичні сполуки. Їх здатність до проліферації та продукування основних білків у контрольованих умовах також робить їх придатними для досліджень у розробці ліків, зокрема, в контексті тестування шкірної токсичності та ефективності. Ці клітини зберігають багато фізіологічних характеристик тканин свого походження, забезпечуючи відповідну модель для досліджень in vitro, спрямованих на розуміння біології шкіри на молекулярному та клітинному рівнях.

Тканина
Дерма
Застосування
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Синоніми
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Донор

Вік донора
Adult
Етнічна приналежність
Кавказець

03Класифікація

Організм
Людина
Секс
Залежно від партії
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

04Характеристики

Морфологія
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Тип клітини
Primary fibroblasts
Пухлиноутворювальний
Ні

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
МЕМ, без рибонуклеозидів, без дезоксирибонуклеозидів (Ми не постачаємо цей продукт; будь ласка, зверніться до інших постачальників. Будь ласка, дайте нам знати, якщо вам потрібна подальша допомога)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS, 2 нг/мл hr-bFGF, 2 мМ стабільного L-глутаміну
Реагент для дисоціації
Трипсин-ЕДТА
Пересадка в нове середовище
Для рутинного культивування адгезивних клітин: Аспіруйте старе культуральне середовище з адгезивних клітин і промийте їх PBS, щоб видалити залишки середовища. Після аспірації PBS додайте відповідний об'єм розчину трипсину/ЕДТА залежно від розміру культуральної посудини (наприклад, 1 мл для колби T25, 3 мл для колби T75) та інкубуйте при кімнатній температурі або 37°C до відокремлення клітин (5-10 хвилин). Спостерігайте за відшаруванням під мікроскопом і, якщо необхідно, обережно постукайте по посудині, щоб звільнити клітини. Після відокремлення додайте повне середовище для інактивації трипсину/ЕДТА, обережно ресуспендуйте клітини і перенесіть аліквоту клітинної суспензії в нову культуральну посудину зі свіжим середовищем. Помістіть посудину в інкубатор, налаштований на 37°C з 5% CO2, і міняйте середовище кожні 2-3 дні.
Щільність висіву
Від 1 до 3*103 клітин/см²
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Розморожування та культивування
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо 90% FBS + 10% ДМСО для підтримки життєздатності або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Експресія та сприйнятливість

Поверхневі антигени
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Експресія білків
Позитивна: CD73/CD90/CD105 Негативні: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Віруси
Негативний на: ВІЛ-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Ідентифікатори

Посилання
Шкірний фібробласт людини, дорослий (HDF-Ad) (номер за каталогом Cytion 300606)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606