
- Tkanivo
- Dermis
- Synonymá
- NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411
Dokumenty
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Primary cell · Číslo výrobku 300606
Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research
Prispôsobenie / Odporúčania
- Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)Primary cell€490.00
01Všeobecné informácie
- Popis
Ľudské dermálne fibroblasty, dospelé (HDF-Ad), sú primárne bunky izolované z vrstvy dermy dospelej ľudskej kože. Tieto bunky zohrávajú kľúčovú úlohu vo fyziológii kože, pretože sú zodpovedné za produkciu zložiek extracelulárnej matrice vrátane kolagénu a elastínu, ktoré sú nevyhnutné na udržanie štruktúry a funkcie kože. Bunky HDF-Ad sa často využívajú vo výskume týkajúcom sa hojenia rán, starnutia a tkanivového inžinierstva vzhľadom na ich významnú úlohu v procesoch obnovy a regenerácie kože. Okrem toho slúžia ako dôležitý model na štúdium správania fibroblastov pri rôznych dermatologických stavoch a ochoreniach.
Bunky HDF-Ad sú vysoko citlivé na vonkajšie podnety, čo z nich robí cenný nástroj na skúmanie bunkových reakcií na rôzne faktory prostredia, ako je UV žiarenie, oxidačný stres a rôzne farmaceutické zlúčeniny. Ich schopnosť množiť sa a produkovať základné proteíny za kontrolovaných podmienok ich tiež robí vhodnými na štúdie pri vývoji liekov, najmä v kontexte testovania dermálnej toxicity a účinnosti. Tieto bunky si zachovávajú mnohé fyziologické vlastnosti svojho pôvodného tkaniva, čím poskytujú vhodný model pre štúdie in vitro zamerané na pochopenie biológie kože na molekulárnej a bunkovej úrovni.
- Tkanivo
- Dermis
- Aplikácie
- UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
- Synonymá
- NHDF-Ad
- HFIB-D
- Human fibroblasts
- dermis adult
- provitro 1210411
02Darca
- Vek darcu
- Adult
- Etnická príslušnosť
- Kaukazský
03Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Špecifické pre danú šaržu
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
04Charakteristiky
- Morfológia
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Typ bunky
- Primary fibroblasts
- Tumorigenický
- Nie
05Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- MEM, bez ribonukleozidov, bez deoxyribonukleozidov (Tento produkt nedodávame; zvážte prosím iných dodávateľov. Ak potrebujete ďalšiu pomoc, dajte nám prosím vedieť)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilného L-glutamínu
- Disociačné činidlo
- Trypsín-EDTA
- Rozmnožovanie kultúr
- Na bežné adherentné bunkové kultúry: Odstráňte staré kultivačné médium z adherentných buniek a premyte ich PBS, aby ste odstránili zvyšné médium. Po odsatí PBS pridajte príslušný objem roztoku trypsínu/EDTA podľa veľkosti kultivačnej nádoby (napr. 1 ml pre banku T25, 3 ml pre banku T75) a inkubujte pri izbovej teplote alebo 37 °C, kým sa bunky neoddelia (5 - 10 minút). Oddeľovanie sledujte pod mikroskopom a v prípade potreby jemne poklepte na nádobu, aby sa bunky uvoľnili. Po oddelení pridajte kompletné médium na inaktiváciu trypsínu/EDTA, jemne resuspendujte bunky a alikvotnú časť bunkovej suspenzie preneste do novej kultivačnej nádoby obsahujúcej čerstvé médium. Nádobu umiestnite do inkubátora nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a médium vymieňajte každé 2 - 3 dni.
- Hustota výsevu
- 1 až 3*103 buniek/cm²
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Zotavenie po rozmrazení
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Rozmrazovanie a kultivácia
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame 90 % FBS + 10 % DMSO na udržanie životaschopnosti alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
07Prejav a náchylnosť
- Povrchové antigény
- CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
- Expresia proteínov
- Pozitívne: CD73/CD90/CD105 Negatívne: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
- Vírusy
- Negatívne pre: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum
08Identifikátory
- Citácia
- Ľudský kožný fibroblast, dospelý (HDF-Ad) (katalógové číslo Cytion 300606)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno