Prejsť na obsah
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Tkanivo
Dermis
Synonymá
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumenty

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Číslo výrobku 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Ľudské dermálne fibroblasty, dospelé (HDF-Ad), sú primárne bunky izolované z vrstvy dermy dospelej ľudskej kože. Tieto bunky zohrávajú kľúčovú úlohu vo fyziológii kože, pretože sú zodpovedné za produkciu zložiek extracelulárnej matrice vrátane kolagénu a elastínu, ktoré sú nevyhnutné na udržanie štruktúry a funkcie kože. Bunky HDF-Ad sa často využívajú vo výskume týkajúcom sa hojenia rán, starnutia a tkanivového inžinierstva vzhľadom na ich významnú úlohu v procesoch obnovy a regenerácie kože. Okrem toho slúžia ako dôležitý model na štúdium správania fibroblastov pri rôznych dermatologických stavoch a ochoreniach.

Bunky HDF-Ad sú vysoko citlivé na vonkajšie podnety, čo z nich robí cenný nástroj na skúmanie bunkových reakcií na rôzne faktory prostredia, ako je UV žiarenie, oxidačný stres a rôzne farmaceutické zlúčeniny. Ich schopnosť množiť sa a produkovať základné proteíny za kontrolovaných podmienok ich tiež robí vhodnými na štúdie pri vývoji liekov, najmä v kontexte testovania dermálnej toxicity a účinnosti. Tieto bunky si zachovávajú mnohé fyziologické vlastnosti svojho pôvodného tkaniva, čím poskytujú vhodný model pre štúdie in vitro zamerané na pochopenie biológie kože na molekulárnej a bunkovej úrovni.

Tkanivo
Dermis
Aplikácie
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Synonymá
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Darca

Vek darcu
Adult
Etnická príslušnosť
Kaukazský

03Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Špecifické pre danú šaržu
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

04Charakteristiky

Morfológia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Typ bunky
Primary fibroblasts
Tumorigenický
Nie

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
MEM, bez ribonukleozidov, bez deoxyribonukleozidov (Tento produkt nedodávame; zvážte prosím iných dodávateľov. Ak potrebujete ďalšiu pomoc, dajte nám prosím vedieť)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilného L-glutamínu
Disociačné činidlo
Trypsín-EDTA
Rozmnožovanie kultúr
Na bežné adherentné bunkové kultúry: Odstráňte staré kultivačné médium z adherentných buniek a premyte ich PBS, aby ste odstránili zvyšné médium. Po odsatí PBS pridajte príslušný objem roztoku trypsínu/EDTA podľa veľkosti kultivačnej nádoby (napr. 1 ml pre banku T25, 3 ml pre banku T75) a inkubujte pri izbovej teplote alebo 37 °C, kým sa bunky neoddelia (5 - 10 minút). Oddeľovanie sledujte pod mikroskopom a v prípade potreby jemne poklepte na nádobu, aby sa bunky uvoľnili. Po oddelení pridajte kompletné médium na inaktiváciu trypsínu/EDTA, jemne resuspendujte bunky a alikvotnú časť bunkovej suspenzie preneste do novej kultivačnej nádoby obsahujúcej čerstvé médium. Nádobu umiestnite do inkubátora nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a médium vymieňajte každé 2 - 3 dni.
Hustota výsevu
1 až 3*103 buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 90 % FBS + 10 % DMSO na udržanie životaschopnosti alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Prejav a náchylnosť

Povrchové antigény
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Expresia proteínov
Pozitívne: CD73/CD90/CD105 Negatívne: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Vírusy
Negatívne pre: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identifikátory

Citácia
Ľudský kožný fibroblast, dospelý (HDF-Ad) (katalógové číslo Cytion 300606)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606