Gå til innholdet
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Vev
Dermis
Synonymer
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumenter

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Produktnummer 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Humane dermale fibroblaster, voksne (HDF-Ad), er primærceller isolert fra dermislaget i huden hos voksne mennesker. Disse cellene spiller en avgjørende rolle i hudens fysiologi, da de er ansvarlige for produksjonen av ekstracellulære matrikskomponenter, inkludert kollagen og elastin, som er avgjørende for å opprettholde hudens struktur og funksjon. HDF-Ad-celler brukes ofte i forskning knyttet til sårheling, aldring og vevsteknikk, på grunn av deres viktige rolle i hudens reparasjons- og regenereringsprosesser. I tillegg fungerer de som en viktig modell for å studere fibroblastatferd ved ulike dermatologiske tilstander og sykdommer.

HDF-Ad-celler er svært følsomme for ytre stimuli, noe som gjør dem til et verdifullt verktøy for å undersøke cellers respons på ulike miljøfaktorer som UV-stråling, oksidativt stress og ulike farmasøytiske forbindelser. Cellenes evne til å formere seg og produsere essensielle proteiner under kontrollerte forhold gjør dem også egnet for studier innen legemiddelutvikling, særlig i forbindelse med testing av dermal toksisitet og effekt. Disse cellene beholder mange av de fysiologiske egenskapene til sitt opprinnelsesvev, noe som gjør dem til en relevant modell for in vitro-studier som tar sikte på å forstå hudens biologi på molekylært og cellulært nivå.

Vev
Dermis
Søknader
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Synonymer
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Donor

Donorens alder
Adult
Etnisitet
Kaukasisk

03Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Tomtespesifikk
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

04Egenskaper

Morfologi
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Celletype
Primary fibroblasts
Tumorinduserende
Nei

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
MEM, uten ribonukleosider, uten deoksyribonukleosider (Vi leverer ikke dette produktet; vennligst vurder andre leverandører. Vennligst gi oss beskjed hvis du trenger ytterligere assistanse)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilt L-glutamin
Dissosiasjonsmiddel
Trypsin-EDTA
Subkultivering
For rutinemessig adherent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Etter at PBS er aspirert, tilsett et passende volum Trypsin/EDTA-løsning basert på størrelsen på dyrkingskaret (f.eks. 1 ml for en T25-kolbe, 3 ml for en T75-kolbe), og inkuber ved romtemperatur eller 37 °C til cellene løsner (5-10 minutter). Overvåk løsrivelsen under mikroskop, og bank forsiktig på beholderen om nødvendig for å frigjøre cellene. Når cellene har løsnet, tilsett komplett medium for å inaktivere trypsin/EDTA, resuspender cellene forsiktig, og overfør en alikvot av cellesuspensjonen til et nytt dyrkingskar som inneholder nytt medium. Plasser karet i en inkubator innstilt på 37 °C med 5 %CO2, og bytt medium hver 2.-3. dag.
Såtetthet
1 til 3*103 celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Tining og dyrking
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 90 % FBS + 10 % DMSO for å opprettholde levedyktigheten, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Proteinekspresjon
Positiv: CD73/CD90/CD105 Negativ: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Virus
Negativ for: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identifikatorer

Kildehenvisning
Humane dermale fibroblaster, voksne (HDF-Ad) (Cytion-katalognummer 300606)
NCBI-skattenummer
9606