
- Vev
- Dermis
- Synonymer
- NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411
Dokumenter
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Primary cell · Produktnummer 300606
Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research
Tilpasning / Anbefalinger
- Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)Primary cell€490.00
01Generell informasjon
- Beskrivelse
Humane dermale fibroblaster, voksne (HDF-Ad), er primærceller isolert fra dermislaget i huden hos voksne mennesker. Disse cellene spiller en avgjørende rolle i hudens fysiologi, da de er ansvarlige for produksjonen av ekstracellulære matrikskomponenter, inkludert kollagen og elastin, som er avgjørende for å opprettholde hudens struktur og funksjon. HDF-Ad-celler brukes ofte i forskning knyttet til sårheling, aldring og vevsteknikk, på grunn av deres viktige rolle i hudens reparasjons- og regenereringsprosesser. I tillegg fungerer de som en viktig modell for å studere fibroblastatferd ved ulike dermatologiske tilstander og sykdommer.
HDF-Ad-celler er svært følsomme for ytre stimuli, noe som gjør dem til et verdifullt verktøy for å undersøke cellers respons på ulike miljøfaktorer som UV-stråling, oksidativt stress og ulike farmasøytiske forbindelser. Cellenes evne til å formere seg og produsere essensielle proteiner under kontrollerte forhold gjør dem også egnet for studier innen legemiddelutvikling, særlig i forbindelse med testing av dermal toksisitet og effekt. Disse cellene beholder mange av de fysiologiske egenskapene til sitt opprinnelsesvev, noe som gjør dem til en relevant modell for in vitro-studier som tar sikte på å forstå hudens biologi på molekylært og cellulært nivå.
- Vev
- Dermis
- Søknader
- UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
- Synonymer
- NHDF-Ad
- HFIB-D
- Human fibroblasts
- dermis adult
- provitro 1210411
02Donor
- Donorens alder
- Adult
- Etnisitet
- Kaukasisk
03Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Tomtespesifikk
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
04Egenskaper
- Morfologi
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Celletype
- Primary fibroblasts
- Tumorinduserende
- Nei
05Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- MEM, uten ribonukleosider, uten deoksyribonukleosider (Vi leverer ikke dette produktet; vennligst vurder andre leverandører. Vennligst gi oss beskjed hvis du trenger ytterligere assistanse)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilt L-glutamin
- Dissosiasjonsmiddel
- Trypsin-EDTA
- Subkultivering
- For rutinemessig adherent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Etter at PBS er aspirert, tilsett et passende volum Trypsin/EDTA-løsning basert på størrelsen på dyrkingskaret (f.eks. 1 ml for en T25-kolbe, 3 ml for en T75-kolbe), og inkuber ved romtemperatur eller 37 °C til cellene løsner (5-10 minutter). Overvåk løsrivelsen under mikroskop, og bank forsiktig på beholderen om nødvendig for å frigjøre cellene. Når cellene har løsnet, tilsett komplett medium for å inaktivere trypsin/EDTA, resuspender cellene forsiktig, og overfør en alikvot av cellesuspensjonen til et nytt dyrkingskar som inneholder nytt medium. Plasser karet i en inkubator innstilt på 37 °C med 5 %CO2, og bytt medium hver 2.-3. dag.
- Såtetthet
- 1 til 3*103 celler/cm²
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Tining og dyrking
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi 90 % FBS + 10 % DMSO for å opprettholde levedyktigheten, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
07Uttrykk og mottakelighet
- Overflateantigener
- CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
- Proteinekspresjon
- Positiv: CD73/CD90/CD105 Negativ: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
- Virus
- Negativ for: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum
08Identifikatorer
- Kildehenvisning
- Humane dermale fibroblaster, voksne (HDF-Ad) (Cytion-katalognummer 300606)
- NCBI-skattenummer
- 9606
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja