
- Chusteczka
- Skóra właściwa
- Synonimy
- NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411
Dokumenty
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Primary cell · Numer produktu 300606
Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research
Dostosowanie / Zalecenia
- Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)Primary cell€490.00
01Informacje ogólne
- Opis
Human Dermal Fibroblasts, Adult (HDF-Ad) to pierwotne komórki izolowane z warstwy skóry właściwej dorosłego człowieka. Komórki te odgrywają kluczową rolę w fizjologii skóry, odpowiadając za produkcję składników macierzy zewnątrzkomórkowej, w tym kolagenu i elastyny, które są niezbędne do utrzymania struktury i funkcji skóry. Komórki HDF-Ad są często wykorzystywane w badaniach związanych z gojeniem się ran, starzeniem i inżynierią tkankową, biorąc pod uwagę ich znaczącą rolę w procesach naprawy i regeneracji skóry. Ponadto służą one jako ważny model do badania zachowania fibroblastów w różnych stanach i chorobach dermatologicznych.
Komórki HDF-Ad są wysoce wrażliwe na bodźce zewnętrzne, co czyni je cennym narzędziem do badania odpowiedzi komórkowych na różne czynniki środowiskowe, takie jak promieniowanie UV, stres oksydacyjny i różne związki farmaceutyczne. Ich zdolność do proliferacji i produkcji niezbędnych białek w kontrolowanych warunkach sprawia, że nadają się również do badań nad rozwojem leków, szczególnie w kontekście toksyczności skórnej i testów skuteczności. Komórki te zachowują wiele cech fizjologicznych tkanki, z której pochodzą, zapewniając odpowiedni model do badań in vitro mających na celu zrozumienie biologii skóry na poziomie molekularnym i komórkowym.
- Chusteczka
- Skóra właściwa
- Zastosowania
- UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
- Synonimy
- NHDF-Ad
- HFIB-D
- Human fibroblasts
- dermis adult
- provitro 1210411
02Darczyńca
- Wiek dawcy
- Adult
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
03Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Specyficzne dla partii
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
04Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Spindle-shaped (fibroblast-like)
- Typ komórki
- Primary fibroblasts
- Nowotworotwórczy
- Nie
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- MEM, bez rybonukleozydów, bez dezoksyrybonukleozydów (Nie dostarczamy tego produktu; prosimy o rozważenie innych dostawców. Daj nam znać, jeśli potrzebujesz dalszej pomocy)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilnej L-glutaminy
- Odczynnik dysocjacyjny
- Trypsyna-EDTA
- Hodowla komórek w subkulturze
- W przypadku rutynowej hodowli komórek przylegających: Odessać starą pożywkę z przylegających komórek i przemyć je PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki. Po odessaniu PBS, dodać odpowiednią objętość roztworu Trypsyna/EDTA w zależności od wielkości naczynia hodowlanego (np. 1 ml dla kolby T25, 3 ml dla kolby T75) i inkubować w temperaturze pokojowej lub 37°C do momentu odłączenia się komórek (5-10 minut). Monitoruj oderwanie pod mikroskopem i delikatnie postukaj w naczynie, jeśli to konieczne, aby uwolnić komórki. Po odłączeniu dodać pełną pożywkę w celu inaktywacji trypsyny/EDTA, delikatnie ponownie zawiesić komórki i przenieść porcję zawiesiny komórek do nowego naczynia hodowlanego zawierającego świeżą pożywkę. Umieść naczynie w inkubatorze ustawionym na 37°C z 5%CO2 i zmieniaj pożywkę co 2-3 dni.
- Gęstość wysiewu
- 1 do 3*103 komórek/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.
- Rozmrażanie i hodowla
Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.
Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.
Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.
Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.
Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.
Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.
Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.
Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 90% FBS + 10% DMSO w celu utrzymania żywotności lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), który zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Ekspresja i podatność
- Antygeny powierzchniowe
- CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
- Ekspresja białek
- Pozytywne: CD73/CD90/CD105 Negatywne: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
- Wirusy
- Ujemny dla: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum
08Identyfikatory
- Źródło
- Ludzki fibroblast skórny, dorosły (HDF-Ad) (numer katalogowy Cytion 300606)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak