Przejdź do treści
Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)
Chusteczka
Skóra właściwa
Synonimy
NHDF-Ad, HFIB-D, Human fibroblasts, dermis adult, provitro 1210411

Dokumenty

Human Dermal Fibroblast, Adult (HDF-Ad)

Primary cell · Numer produktu 300606

Dermal fibroblasts for skin aging and fibrosis research

€490.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Human Dermal Fibroblasts, Adult (HDF-Ad) to pierwotne komórki izolowane z warstwy skóry właściwej dorosłego człowieka. Komórki te odgrywają kluczową rolę w fizjologii skóry, odpowiadając za produkcję składników macierzy zewnątrzkomórkowej, w tym kolagenu i elastyny, które są niezbędne do utrzymania struktury i funkcji skóry. Komórki HDF-Ad są często wykorzystywane w badaniach związanych z gojeniem się ran, starzeniem i inżynierią tkankową, biorąc pod uwagę ich znaczącą rolę w procesach naprawy i regeneracji skóry. Ponadto służą one jako ważny model do badania zachowania fibroblastów w różnych stanach i chorobach dermatologicznych.

Komórki HDF-Ad są wysoce wrażliwe na bodźce zewnętrzne, co czyni je cennym narzędziem do badania odpowiedzi komórkowych na różne czynniki środowiskowe, takie jak promieniowanie UV, stres oksydacyjny i różne związki farmaceutyczne. Ich zdolność do proliferacji i produkcji niezbędnych białek w kontrolowanych warunkach sprawia, że nadają się również do badań nad rozwojem leków, szczególnie w kontekście toksyczności skórnej i testów skuteczności. Komórki te zachowują wiele cech fizjologicznych tkanki, z której pochodzą, zapewniając odpowiedni model do badań in vitro mających na celu zrozumienie biologii skóry na poziomie molekularnym i komórkowym.

Chusteczka
Skóra właściwa
Zastosowania
UVA-induced photoaging: oxidative stress, MAPK/AP-1 signaling and MMP-1 expression; Cellular senescence after UVA exposure (SA-β-gal, p16, SIRT1/mTOR signaling); Accumulation and degradation of advanced glycation end products in photoaged fibroblasts; Epigenetic regulation of MMP-1 and collagen loss in skin photoaging; Fibrosis research and systemic sclerosis (TGF-β/SMAD signaling, collagen production); Dermal compartment of reconstructed human skin for skin sensitization studies
Synonimy
  • NHDF-Ad
  • HFIB-D
  • Human fibroblasts
  • dermis adult
  • provitro 1210411

02Darczyńca

Wiek dawcy
Adult
Pochodzenie etniczne
Kaukaski

03Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Specyficzne dla partii
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

04Cechy charakterystyczne

Morfologia
Spindle-shaped (fibroblast-like)
Typ komórki
Primary fibroblasts
Nowotworotwórczy
Nie

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
MEM, bez rybonukleozydów, bez dezoksyrybonukleozydów (Nie dostarczamy tego produktu; prosimy o rozważenie innych dostawców. Daj nam znać, jeśli potrzebujesz dalszej pomocy)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 2 ng/ml hr-bFGF, 2 mM stabilnej L-glutaminy
Odczynnik dysocjacyjny
Trypsyna-EDTA
Hodowla komórek w subkulturze
W przypadku rutynowej hodowli komórek przylegających: Odessać starą pożywkę z przylegających komórek i przemyć je PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki. Po odessaniu PBS, dodać odpowiednią objętość roztworu Trypsyna/EDTA w zależności od wielkości naczynia hodowlanego (np. 1 ml dla kolby T25, 3 ml dla kolby T75) i inkubować w temperaturze pokojowej lub 37°C do momentu odłączenia się komórek (5-10 minut). Monitoruj oderwanie pod mikroskopem i delikatnie postukaj w naczynie, jeśli to konieczne, aby uwolnić komórki. Po odłączeniu dodać pełną pożywkę w celu inaktywacji trypsyny/EDTA, delikatnie ponownie zawiesić komórki i przenieść porcję zawiesiny komórek do nowego naczynia hodowlanego zawierającego świeżą pożywkę. Umieść naczynie w inkubatorze ustawionym na 37°C z 5%CO2 i zmieniaj pożywkę co 2-3 dni.
Gęstość wysiewu
1 do 3*103 komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia

Post-thaw viability ≥ 70 % viable cells. More than 80 % confluence within the expected recovery period.

Rozmrażanie i hodowla
  1. Thaw the cryovial quickly in a 37 °C water bath, swirling gently. Just before the last ice has melted, move the vial to a laminar flow hood and decontaminate its outer surface.

  2. Transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube, add 10 ml of Fibroblast Growth Medium and centrifuge at 250 × g for 5 minutes.

  3. Remove the supernatant and resuspend the cell pellet in 10 ml of Fibroblast Growth Medium. Check cell number and viability.

  4. Divide the suspension between two 25 cm² culture flasks (5 ml each). Using two flasks reduces the risk of losing all cells if a passage fails.

  5. Incubate at 37 °C, 5 % CO₂ and saturated humidity, with the screw caps opened by half a turn for gas exchange.

  6. Change the medium after 24 hours to remove unattached cells, then every 48 to 72 hours, using pre-warmed medium only.

  7. Subculture the cells at about 75 % confluence. Denser cultures undergo irreversible contact inhibition and stop proliferating. Use the subculture reagents recommended on the certificate of analysis.

  8. Recommended seeding density: more than 4,000 cells/cm².

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 90% FBS + 10% DMSO w celu utrzymania żywotności lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), który zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Ekspresja i podatność

Antygeny powierzchniowe
CD90⁺, CD31⁻, CD45⁻
Ekspresja białek
Pozytywne: CD73/CD90/CD105 Negatywne: CD14/CD34/CD45/HLA-DR
Wirusy
Ujemny dla: HIV-1/2, HBV, HCV, HSV1/2, CMV, EBV, HHV6, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Ureoplasma parvum

08Identyfikatory

Źródło
Ludzki fibroblast skórny, dorosły (HDF-Ad) (numer katalogowy Cytion 300606)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606