Ir diretamente para o conteúdo
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Tecido
Prepúcio

Documentos

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Número do produto 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
1

01Informações gerais

Descrição

As células fibroblásticas do prepúcio humano (HFFC) são derivadas do tecido fibroblástico do prepúcio juvenil. Estas células são uma ferramenta essencial no estudo da biologia humana, particularmente em pesquisas relacionadas com a cicatrização de feridas, biologia da pele e senescência celular. Os fibroblastos desempenham um papel fundamental na síntese da matriz extracelular e do colagénio, que são componentes cruciais do tecido conjuntivo. As HFFC são frequentemente utilizadas em experiências que exploram os mecanismos de desenvolvimento da pele, remodelação dérmica e respostas celulares a vários fatores de crescimento e citocinas.

As HFFC são caracterizadas pela sua morfologia fusiforme e pela sua capacidade de proliferar rapidamente in vitro, tornando-as adequadas para várias aplicações experimentais, incluindo engenharia de tecidos, medicina regenerativa e triagem de medicamentos. Estas células também são valiosas em estudos que investigam os efeitos da radiação UV nas células da pele, a fisiopatologia das doenças fibróticas e o processo de envelhecimento da pele. Devido à sua origem neonatal, as HFFC são menos propensas a acumular mutações em comparação com os fibroblastos adultos, tornando-as um modelo ideal para estudar as funções celulares primárias.

Tecido
Prepúcio

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente

03Características

Morfologia
Fibroblastos

04Identificadores

Referência
Células de fibroblastos de prepúcio humano (HFFC) (número de catálogo Cytion 300715)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 10 ng/mL de bFGF, 10 microgramas/L de insulina
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 90% de FBS + 10% de DMSO para manter a viabilidade, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.