Μετάβαση στο περιεχόμενο
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Ιστός
Ακροποσθία

Έγγραφα

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα ανθρώπινα ινοβλαστικά κύτταρα του ακροποσθίου (HFFC) προέρχονται από τον ινοβλαστικό ιστό του ακροποσθίου νεαρών ατόμων. Αυτά τα κύτταρα αποτελούν ένα ουσιαστικό εργαλείο στη μελέτη της ανθρώπινης βιολογίας, ιδιαίτερα στην έρευνα που σχετίζεται με την επούλωση τραυμάτων, τη βιολογία του δέρματος και τη κυτταρική γήρανση. Οι ινοβλάστες διαδραματίζουν κρίσιμο ρόλο στη σύνθεση της εξωκυτταρικής μήτρας και του κολλαγόνου, που είναι βασικά συστατικά του συνδετικού ιστού. Τα HFFC χρησιμοποιούνται συχνά σε πειράματα που διερευνούν τους μηχανισμούς ανάπτυξης του δέρματος, την αναδιαμόρφωση του δέρματος και τις κυτταρικές αντιδράσεις σε διάφορους αυξητικούς παράγοντες και κυτοκίνες.

Τα HFFC χαρακτηρίζονται από τη μορφολογία τους σε σχήμα ατράκτου και την ικανότητά τους να πολλαπλασιάζονται γρήγορα in vitro, γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για διάφορες πειραματικές εφαρμογές, όπως η μηχανική ιστών, η αναγεννητική ιατρική και ο έλεγχος φαρμάκων. Αυτά τα κύτταρα είναι επίσης πολύτιμα σε μελέτες που διερευνούν τις επιδράσεις της υπεριώδους ακτινοβολίας στα κύτταρα του δέρματος, την παθοφυσιολογία των ινωτικών ασθενειών και τη διαδικασία γήρανσης του δέρματος. Λόγω της νεογνικής τους προέλευσης, τα HFFC είναι λιγότερο πιθανό να έχουν συσσωρεύσει μεταλλάξεις σε σύγκριση με τους ενήλικες ινοβλάστες, γεγονός που τα καθιστά ιδανικό μοντέλο για τη μελέτη των πρωτογενών κυτταρικών λειτουργιών.

Ιστός
Ακροποσθία

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Κύτταρα ινοβλαστών ανθρώπινης ακροποσθίας (HFFC) (αριθμός καταλόγου Cytion 300715)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 10 ng/mL bFGF, 10 microgram/L ινσουλίνης
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε 90% FBS + 10% DMSO για τη διατήρηση της βιωσιμότητας ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.