Mine otse sisu juurde
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Kude
Eesnahk

Dokumendid

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Toote number 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese eesnahka fibroblastrakud (HFFC) on saadud noorukite eesnahka fibroblastkudedest. Need rakud on oluline vahend inimese bioloogia uurimisel, eriti haavade paranemise, naha bioloogia ja rakkude vananemisega seotud uuringutes. Fibroblastid mängivad olulist rolli ekstratsellulaarse maatriksi ja kollageeni sünteesis, mis on sidekoe olulised komponendid. HFFC-d kasutatakse sageli katsetes, mis uurivad naha arengu mehhanisme, naha ümberkujundamist ja rakkude reaktsioone erinevatele kasvufaktoritele ja tsütokiinidele.

HFFC-d iseloomustab nende värtjas morfoloogia ja võime kiiresti paljuneda in vitro, mis teeb need sobivaks mitmesugusteks eksperimentaalseteks rakendusteks, sealhulgas koetehnoloogia, regeneratiivne meditsiin ja ravimite sõelumine. Need rakud on väärtuslikud ka uuringutes, mis uurivad UV-kiirguse mõju naharakkudele, fibroosiliste haiguste patofüsioloogiat ja naha vananemisprotsessi. Kuna HFFC on pärit vastsündinutelt, on neil vähem mutatsioone kui täiskasvanud fibroblastidel, mis teeb neist ideaalse mudeli primaarrakkude funktsioonide uurimiseks.

Kude
Eesnahk

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
Inimese eesnaha fibroblastide rakud (HFFC) (Cytion kataloogi number 300715)
NCBI maksukood
9606

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogrammi/L insuliini
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimise keskkonda kasutame 90% FBS + 10% DMSO elujõulisuse säilitamiseks või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.