Prejsť na obsah
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Tkanivo
Predkožka

Dokumenty

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Číslo výrobku 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Ľudské fibroblastové bunky predkožky (HFFC) pochádzajú z fibroblastového tkaniva mladistvej predkožky. Tieto bunky sú nevyhnutným nástrojom pri štúdiu ľudskej biológie, najmä pri výskume zameranom na hojenie rán, biológiu kože a bunkové starnutie. Fibroblasty hrajú kľúčovú úlohu v syntéze extracelulárnej matice a kolagénu, ktoré sú dôležitými zložkami spojivového tkaniva. HFFC sa často využívajú v experimentoch zameraných na skúmanie mechanizmov vývoja kože, remodelácie kože a bunkových reakcií na rôzne rastové faktory a cytokíny.

HFFC sa vyznačujú svojou vretenovitou morfológiou a schopnosťou rýchlo sa množiť in vitro, vďaka čomu sú vhodné pre rôzne experimentálne aplikácie, vrátane tkanivového inžinierstva, regeneratívnej medicíny a skríningu liekov. Tieto bunky sú tiež cenné v štúdiách skúmajúcich vplyv UV žiarenia na kožné bunky, patofyziológiu fibrotických ochorení a proces starnutia kože. Vzhľadom na svoj neonatálny pôvod je menej pravdepodobné, že HFFC akumulovali mutácie v porovnaní s dospelými fibroblastami, čo z nich robí ideálny model na štúdium primárnych bunkových funkcií.

Tkanivo
Predkožka

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Rastové vlastnosti
Prívrženec

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
Bunky ľudského predkožkového fibroblastu (HFFC) (katalógové číslo Cytion 300715)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramov/l inzulínu
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 90 % FBS + 10 % DMSO na udržanie životaschopnosti alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.