Preskoči na vsebino
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Tkivo
Predkožka

Dokumenti

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Številka izdelka 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Človeške fibroblastne celice iz predkožice (HFFC) izhajajo iz fibroblastnega tkiva mladostne predkožice. Te celice so bistveno orodje v študiju človeške biologije, zlasti v raziskavah, povezanih z celjenjem ran, biologijo kože in celično staranje. Fibroblasti imajo ključno vlogo pri sintezi ekstracelularne matrice in kolagena, ki sta bistvena sestavna dela vezivnega tkiva. HFFC se pogosto uporabljajo v poskusih, ki raziskujejo mehanizme razvoja kože, preoblikovanja dermisa in celičnih odzivov na različne rastne faktorje in citokine.

HFFC se odlikujejo po vretenasti morfologiji in sposobnosti hitre proliferacije in vitro, zaradi česar so primerni za različne eksperimentalne aplikacije, vključno s tkivnim inženirstvom, regenerativno medicino in presejanjem zdravil. Te celice so dragocene tudi v študijah, ki preučujejo učinke UV-sevanja na kožne celice, patofiziologijo fibrotičnih bolezni in proces staranja kože. Zaradi svojega neonatalnega izvora je manj verjetno, da so HFFC nakopičile mutacije v primerjavi z odraslimi fibroblasti, kar jih naredi idealni model za preučevanje primarnih celičnih funkcij.

Tkivo
Predkožka

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Lastnosti rasti
Pripadnik

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
Fibroblastične celice človeške predkožke (HFFC) (kataloška številka Cytion 300715)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramov/l inzulina
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 90 % FBS + 10 % DMSO za ohranjanje viabilnosti ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.