Siirry sisältöön
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Kudos
Esinahka

Asiakirjat

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Tuotenumero 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Ihmisen esinahan fibroblastisolut (HFFC) ovat peräisin nuoren esinahan fibroblastikudoksesta. Nämä solut ovat välttämätön työkalu ihmisen biologian tutkimuksessa, erityisesti haavan paranemiseen, ihon biologiaan ja solujen ikääntymiseen liittyvissä tutkimuksissa. Fibroblastit ovat tärkeässä roolissa soluväliaineen ja kollageenin synteesissä, jotka ovat sidekudoksen keskeisiä komponentteja. HFFC-soluja käytetään usein kokeissa, joissa tutkitaan ihon kehityksen mekanismeja, ihon uudistumista ja solujen reaktioita erilaisiin kasvutekijöihin ja sytokiinien.

HFFC-soluille on ominaista sukkulamainen morfologia ja kyky lisääntyä nopeasti in vitro, minkä ansiosta ne soveltuvat erilaisiin kokeellisiin sovelluksiin, kuten kudostekniikkaan, regeneratiiviseen lääketieteeseen ja lääkeaineiden seulontaan. Nämä solut ovat arvokkaita myös tutkimuksissa, joissa tutkitaan UV-säteilyn vaikutuksia ihosoluihin, fibroottisten sairauksien patofysiologiaa ja ihon ikääntymisprosessia. Koska HFFC-solut ovat peräisin vastasyntyneistä, niissä on todennäköisesti vähemmän mutaatioita kuin aikuisten fibroblasteissa, mikä tekee niistä ihanteellisen mallin primaaristen solutoimintojen tutkimiseen.

Kudos
Esinahka

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
Ihmisen esinahan fibroblastisolut (HFFC) (Cytionin luettelonumero 300715)
NCBI-verotunnus
9606

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 10 ng/mL bFGF:llä, 10 mikrogrammaa/l insuliinia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 90 % FBS + 10 % DMSO:ta elinkelpoisuuden ylläpitämiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.