Премини към съдържанието
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Тъкан
Предкожието

Документи

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Номер на продукта 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Човешките фибробластни клетки от препуциума (HFFC) се извличат от фибробластната тъкан на ювенилния препуциум. Тези клетки са незаменим инструмент в изучаването на човешката биология, особено в изследванията, свързани с заздравяването на рани, биологията на кожата и клетъчното стареене. Фибробластите играят важна роля в синтеза на екстрацелуларния матрикс и колагена, които са ключови компоненти на съединителната тъкан. HFFC често се използват в експерименти, изследващи механизмите на развитие на кожата, дермално преобразуване и клетъчните реакции към различни растежни фактори и цитокини.

HFFC се характеризират с форма на вретено и способност за бързо размножаване in vitro, което ги прави подходящи за различни експериментални приложения, включително тъканно инженерство, регенеративна медицина и скрининг на лекарства. Тези клетки са ценни и в проучвания, изследващи ефектите на ултравиолетовото лъчение върху кожните клетки, патофизиологията на фибротичните заболявания и процеса на стареене на кожата. Поради своя неонатален произход, HFFC са по-малко склонни да натрупват мутации в сравнение с възрастните фибропласти, което ги прави идеален модел за изучаване на първичните клетъчни функции.

Тъкан
Предкожието

02Класификация

Организъм
Човек
Свойства, свързани с растежа
Привърженик

03Характеристики

Морфология
Фибробласти

04Идентификатори

Източник
Човешки фибробластни клетки от препуциум (HFFC) (каталожен номер 300715 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 10 ng/mL bFGF, 10 микрограма/L инсулин
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме 90% FBS + 10% DMSO за поддържане на жизнеспособността или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.