Przejdź do treści
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Chusteczka
Napletek

Dokumenty

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Numer produktu 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki fibroblastów ludzkiej napletka (HFFC) pochodzą z tkanki fibroblastycznej młodzieńczego napletka. Komórki te są niezbędnym narzędziem w badaniach nad biologią człowieka, szczególnie w badaniach związanych z gojeniem się ran, biologią skóry i starzeniem się komórek. Fibroblasty odgrywają kluczową rolę w syntezie macierzy zewnątrzkomórkowej i kolagenu, które są istotnymi składnikami tkanki łącznej. Komórki HFFC są często wykorzystywane w eksperymentach badających mechanizmy rozwoju skóry, przebudowy skóry właściwej oraz reakcje komórkowe na różne czynniki wzrostu i cytokiny.

Komórki HFFC charakteryzują się wrzecionowatym kształtem i zdolnością do szybkiego namnażania się in vitro, dzięki czemu nadają się do różnych zastosowań eksperymentalnych, w tym inżynierii tkankowej, medycyny regeneracyjnej i badań przesiewowych leków. Komórki te są również cenne w badaniach nad wpływem promieniowania UV na komórki skóry, patofizjologią chorób zwłóknieniowych i procesem starzenia się skóry. Ze względu na swoje noworodkowe pochodzenie, HFFC są mniej podatne na gromadzenie mutacji w porównaniu z fibroblastami dorosłych, co czyni je idealnym modelem do badania podstawowych funkcji komórkowych.

Chusteczka
Napletek

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Fibroblast

04Identyfikatory

Źródło
Komórki fibroblastów ludzkiej skóry napletka (HFFC) (numer katalogowy Cytion 300715)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramów/ml insuliny
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 90% FBS + 10% DMSO w celu utrzymania żywotności lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), który zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.