Přejít na obsah
Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)
Tkáň
Předkožka

Dokumenty

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC)

Cell line · Číslo výrobku 300715

Human Foreskin Fibroblast Cells (HFFC) are derived from the fibroblastic tissue of juvenile foreskin. These cells are an essential tool in the study of hu...

€700.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Lidské fibroblastové buňky předkožky (HFFC) jsou odvozeny z fibroblastické tkáně mladistvé předkožky. Tyto buňky jsou nezbytným nástrojem ve studiu lidské biologie, zejména ve výzkumu souvisejícím s hojením ran, biologií kůže a buněčným stárnutím. Fibroblasty hrají klíčovou roli v syntéze extracelulární matrice a kolagenu, které jsou zásadními složkami pojivové tkáně. HFFC se často využívají v experimentech zkoumajících mechanismy vývoje kůže, remodelace dermis a buněčné reakce na různé růstové faktory a cytokiny.

HFFC se vyznačují vřetenovitým tvarem a schopností rychle se množit in vitro, což je předurčuje pro různé experimentální aplikace, včetně tkáňového inženýrství, regenerativní medicíny a screeningu léčiv. Tyto buňky jsou také cenné ve studiích zkoumajících účinky UV záření na kožní buňky, patofyziologii fibrotických onemocnění a proces stárnutí kůže. Vzhledem k jejich novorozeneckému původu je u HFFC méně pravděpodobné, že se v nich nahromadily mutace ve srovnání s dospělými fibroblasty, což z nich činí ideální model pro studium primárních buněčných funkcí.

Tkáň
Předkožka

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Růstové vlastnosti
Přívrženec

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
Lidské fibroblastové buňky předkožky (HFFC) (katalogové číslo Cytion 300715)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramů/l inzulínu
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 90 % FBS + 10 % DMSO pro udržení životaschopnosti nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryokonzervačním procesem.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.