Preskoči na vsebino
Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)
Tkivo
Kostni mozeg

Dokumenti

Human Mesenchymal Stem Cells, Bone Marrow (HMSC-BM)

Cell line · Številka izdelka 300665

Human Mesenchymal Stem Cells derived from Bone Marrow (HMSC-BM) represent a robust and versatile tool for in vitro research. These multipotent mesenchymal...

€690.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Človeške mezenhimalne izvorne celice, pridobljene iz kostnega mozga (HMSC-BM), predstavljajo robustno in vsestransko orodje za raziskave in vitro. Te multipotentne mezenhimalne stromalne celice (MSC) imajo edinstveno sposobnost samoponovne in diferenciacije v širok spekter celic, vključno z adipociti, osteoblasti in hondrociti. Potencial HMSC-BM za diferenciacijo v te tri ključne linije je dobro dokumentiran, kar jih naredi neprecenljive za študije, osredotočene na regenerativno medicino, tkivno inženirstvo in poti celične diferenciacije. Te MSC se gojijo pod strogimi pogoji, kar zagotavlja njihovo multipotentnost in visoko vitalnost po odmrzovanju.

Ena od značilnosti HMSC-BM v primerjavi z MSC iz drugih virov, kot so maščobno tkivo ali popkovina, je njihova izjemna sposobnost osteogene diferenciacije. Zaradi tega so še posebej uporabne v kostni biologiji in ortopedskih raziskavah, kjer je razumevanje molekularnih mehanizmov, ki uravnavajo nastajanje in obnovo kosti, ključnega pomena. Poleg tega imajo HMSC-BM močan imunomodulatorni profil, kar jih naredi odličen model za preučevanje imunskih interakcij in vnetnih odzivov. Te edinstvene lastnosti HMSC-BM postavljajo v položaj prednostne izbire za predklinične študije, ki raziskujejo mikrookolje kostnega mozga, hematopoiezo in patofiziologijo bolezni, povezanih s kostnim mozgom.

Vsaka kriovialka HMSC-BM vsebuje najmanj 1 x 106 celic, s stopnjo vitalnosti med 92 % in 95 %, kot je bilo ugotovljeno s testom izključitve barvila Trypan Blue. Te celice izvirajo iz kostnega mozga, zbranega od zdravih odraslih darovalcev, ki so vsi dali prostovoljno soglasje. Da bi zagotovili najvišje standarde, vsaka serija preide stroge teste kakovosti za oceno identifikacije, čistosti, moči in vitalnosti celic. Ti temeljiti testi zagotavljajo, da MSC izpolnjujejo stroga merila, zaradi česar so primerne za široko paleto raziskovalnih aplikacij, vključno z raziskavami celične biologije, odkrivanjem zdravil in preučevanjem celičnih odzivov na različne dražljaje. Te celice niso namenjene terapevtskim ali in vivo aplikacijam, njihova uporaba pa je omejena na raziskovalne namene v nadzorovanem laboratorijskem okolju.

Tkivo
Kostni mozeg
Uporaba
Testiranje zdravil, regenerativna medicina, raziskave bolezni

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Dobro razporejena vretenasto oblikovana, fibroblastom podobna morfologija za vsaj 5 prehodov. Manj kot 2 % celic kaže spontano miofibroblastom podobno morfologijo v vsakem prehodu.
Vrsta celice
Matična celica

04Identifikatorji

Navajanje vira
Človeške mezenhimske matične celice, kostni mozeg (HMSC-BM) (kataloška številka Cytion 300665)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Za identifikacijo gojenih MSC (P2-P3) pred kriokonzervacijo se pri analizi s pretočno citometrijo uporabi obsežen panel označevalcev, vključno s CD73/CD90/CD105 (pozitivni) in CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativni). Te označevalce priporoča odbor ISCT MSC.
Virusi
Darovalec je negativen na HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) in HIV-1/2 (IFA). Celice so negativne na HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum in Ureaplasma parvum.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w/o: Ribonukleozidi, w/o: NaHCO3, w: 1,0 mM natrijev piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM deoksiribonukleozidi
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Reagenca za disociacijo
Tripsin-EDTA
Preusmeritev v drugo kulturo
Za rutinsko gojenje adherentnih celic: Iz adherentnih celic odsesajte staro gojišče in jih sperite s PBS, da odstranite preostalo gojišče. Po odsesanju PBS dodajte ustrezno količino raztopine tripsina/EDTA glede na velikost posode za gojenje (npr. 1 ml za bučko T25, 3 ml za bučko T75) in inkubirajte pri sobni temperaturi ali 37 °C, dokler se celice ne ločijo (5-10 minut). Odlepitev spremljajte pod mikroskopom in po potrebi nežno potrkajte posodo, da se celice sprostijo. Ko se celice odcepijo, dodajte popolno gojišče za inaktivacijo tripsina/EDTA, nežno ponovno suspendirajte celice in prenesite alikvot celične suspenzije v novo posodo za gojenje s svežim gojiščem. Posodo postavite v inkubator, nastavljen na 37 °C s 5 %CO2, in gojišče zamenjajte vsake 2 do 3 dni.
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
Prva obnova tekočine po 24 urah, nato na 2 do 3 dni.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo 80 % FBS + 10 % bazičnega gojišča + 10 % DMSO za ohranjanje viabilnosti ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100) za boljšo krioprotekcijo, ki preprečuje neželeno diferenciacijo in hkrati ohranja pluripotentnost.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Prosimo, povprašajte
Etnična pripadnost
Kavkaški