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Human Mesenchymal Stem Cells, Adipose Tissue
Pañuelo de papel
Tejido adiposo

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Human Mesenchymal Stem Cells, Adipose Tissue

Cell line · Número de producto 300645

Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) derived from adipose tissue are multipotent stromal cells capable of differentiating into various cell lineages, incl...

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01Información general

Descripción

Las células madre mesenquimales humanas (hMSC) derivadas del tejido adiposo son células estromales multipotentes capaces de diferenciarse en diversos linajes celulares, incluidos adipocitos, osteoblastos y condrocitos. Estas células se aíslan de la fracción vascular estromal del tejido adiposo, que es una fuente rica en células madre mesenquimales en comparación con otros tejidos. Las hMSC derivadas del tejido adiposo son especialmente valoradas en la investigación debido a su accesibilidad, facilidad de aislamiento y mayor rendimiento, lo que las convierte en una herramienta crucial para los estudios en medicina regenerativa, ingeniería tisular y terapia celular.

Las hMSC son células multipotentes autorrenovables que pueden dirigirse para diferenciarse en una amplia variedad de tipos celulares in vitro. La diferenciación directa de estas células en adipocitos, osteoblastos y condrocitos ha sido bien documentada utilizando medios de diferenciación específicos. Las hMSC de paso temprano se criopreservan utilizando un criomedio especializado, lo que garantiza que la viabilidad tras la descongelación se mantenga en un mínimo del 92 % al 95 %, tal y como confirma la prueba de exclusión con azul de tripano. Cada criovial contiene 1 x 106 células, recogidas de donantes sanos que dieron su consentimiento informado para la donación de material celular.

Las hMSC derivadas del tejido adiposo muestran una gran capacidad de autorrenovación y pueden expandirse ampliamente in vitro sin perder su potencial de diferenciación. Estas células se someten a rigurosas pruebas de control de calidad para garantizar su identificación, pureza, potencia, viabilidad e idoneidad para las aplicaciones de investigación in vitro previstas. Dada su multipotencia, sus efectos inmunomoduladores y sus capacidades de señalización paracrina, las hMSC derivadas del tejido adiposo se utilizan ampliamente en diversas aplicaciones de investigación, como el cribado de fármacos, la modelización de enfermedades y la comprensión de los mecanismos que subyacen a la diferenciación de las células madre. Sin embargo, es esencial señalar que estas células no están destinadas a aplicaciones terapéuticas o in vivo.

Lo que diferencia a las hMSC derivadas del tejido adiposo de las hMSC derivadas de otros tejidos, como la médula ósea o el cordón umbilical, es su mayor tasa de proliferación y su mayor capacidad de diferenciación adipogénica. Estas células también muestran un efecto inmunomodulador más pronunciado, debido en parte a su perfil secretómico único, que incluye una mayor expresión de citocinas y factores de crecimiento implicados en las respuestas antiinflamatorias. Además, las hMSC derivadas del tejido adiposo son más fáciles de obtener y requieren procedimientos menos invasivos para su aislamiento en comparación con las hMSC derivadas de la médula ósea, lo que las convierte en la opción preferida de muchos investigadores. Sus características distintivas hacen que las hMSC derivadas del tejido adiposo sean especialmente adecuadas para estudios centrados en trastornos metabólicos, regulación inmunitaria y medicina regenerativa.

Pañuelo de papel
Tejido adiposo
Aplicaciones
Análisis de fármacos, medicina regenerativa, investigación de enfermedades

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Morfología fusiforme y fibroblástica bien extendida durante al menos 5 pases. Menos del 2% de las células muestran una morfología espontánea similar a la de los miofibroblastos en cada pasaje.
Tipo de célula
Células madre

04Identificadores

Referencia
Células madre mesenquimales humanas, tejido adiposo (Cytion número de catálogo 300645)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
En el análisis de citometría de flujo se utiliza un amplio panel de marcadores, incluidos CD73/CD90/CD105 (positivos) y CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativos), para identificar las CMM cultivadas (P2-P3) antes de la criopreservación. Estos marcadores están recomendados por el comité de MSC del ISCT.
Virus
El donante es negativo para VHB (PCR), Treponema pallidum (PCR) y VIH-1/2 (IFA). Las células son negativas para VHB, VHC, VHS1, VHS2, CMV, VEB, VHH6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum y Ureaplasma parvum.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM alfa, con: 2,0 mM de glutamina estable, sin Ribonucleósidos, w/o: Desoxirribonucleósidos, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2g/L NaHCO3
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Reactivo de disociación
Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C hasta que las células se desprendan (5-10 minutos). Controlar el desprendimiento con un microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Primera renovación de líquidos a las 24 horas, después cada 2 ó 3 días.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos 80% FBS + 10% medio basal + 10% DMSO para mantener la viabilidad, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion) para una crioprotección superior, evitando la diferenciación no deseada y preservando la pluripotencia.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Infórmese
Origen étnico
Caucásico