Human Mesenchymal Stem Cells, Adipose Tissue

No taukaudiem iegūtas cilvēka mesenchimālās cilmes šūnas (hMSC) ir daudzpotences stromas šūnas, kas spēj diferencēties dažādās šūnu līnijās, tostarp adipocītos, osteoblastos un hondrocītos. Šīs šūnas izolē no taukaudu stromas asinsvadu frakcijas, kas salīdzinājumā ar citiem audiem ir bagāts mesenchimālo cilmes šūnu avots. No taukaudiem iegūtas hMSC ir īpaši vērtīgas pētniecībā, jo tās ir viegli pieejamas, viegli izdalāmas un to ražība ir augsta, tādējādi padarot tās par svarīgu instrumentu pētījumos reģeneratīvajā medicīnā, audu inženierijā un šūnu terapijā.

hMSC ir pašatjaunojošas multipotentās šūnas, kuras var virzīt diferenciācijai dažādos šūnu tipos in vitro. Šo šūnu tieša diferenciācija adipocītos, osteoblastos un hondrocītos ir labi dokumentēta, izmantojot specifiskus diferenciācijas barotnes. Agrīnās paaudzes hMSC tiek kriokonservētas, izmantojot specializētu kriovidējošo vidi, nodrošinot, ka pēc atkausēšanas dzīvotspēja tiek saglabāta vismaz 92% līdz 95% līmenī, kā to apstiprina Trypan Blue krāsvielas izslēgšanas tests. Katrs kriovials satur 1 x 10⁶ šūnas, kas ievāktas no veseliem donoriem, kuri devuši informētu piekrišanu šūnu materiāla ziedošanai.

No taukaudiem iegūtas hMSC izrāda spēcīgas pašatjaunošanās spējas un var tikt plaši pavairotas in vitro, nezaudējot diferenciācijas potenciālu. Šīs šūnas tiek pakļautas stingrai kvalitātes kontrolei, lai nodrošinātu to identifikāciju, tīrību, iedarbīgumu, dzīvotspēju un piemērotību paredzētajiem in vitro pētniecības pielietojumiem. Ņemot vērā to daudzpotencitāti, imūnmodulējošo iedarbību un parakrīno signālu pārraides spējas, no taukaudiem iegūtas hMSC tiek plaši izmantotas dažādos pētījumos, tostarp zāļu skrīningā, slimību modelēšanā un cilmes šūnu diferenciācijas mehānismu izpētē. Tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka šīs šūnas nav paredzētas terapeitiskai vai in vivo lietošanai.

Tauku audos iegūtas hMSC no citos audos, piemēram, kaulu smadzenēs vai nabassaitē, iegūtām hMSC atšķir tās augstākais proliferācijas ātrums un lielāka adipogēnās diferenciācijas spēja. Šīs šūnas arī izrāda izteiktāku imūnmodulējošu iedarbību, daļēji pateicoties to unikālajam sekretomu profilam, kas ietver augstāku citokīnu un augšanas faktoru ekspresiju, kas iesaistīti pretiekaisuma reakcijās. Turklāt no taukiem iegūtas hMSC ir vieglāk pieejamas un to izdalīšanai nepieciešamas mazāk invazīvas procedūras salīdzinājumā ar no kaulu smadzenēm iegūtām hMSC, tādēļ daudzi pētnieki tās izvēlas. To atšķirīgās īpašības padara no taukiem iegūtas hMSC īpaši piemērotas pētījumiem, kas vērsti uz vielmaiņas traucējumiem, imūnregulāciju un reģeneratīvo medicīnu.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu