HEK293-PSMA

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Las células HEK293-PSMA son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de manera estable el antígeno de membrana específico de la próstata humano (PSMA), también conocido como glutamato carboxipeptidasa II (FOLH1/GCPII). El PSMA es una glicoproteína transmembrana de tipo II con actividad enzimática de hidrolasa de folato y carboxipeptidasa, que se expresa en altos niveles en el cáncer de próstata, particularmente en los casos avanzados, metastásicos y resistentes a la castración. Además de en los tumores malignos de próstata, también se ha observado la expresión del PSMA en la neovascularización de diversos tumores sólidos. Debido a su fuerte expresión asociada a los tumores y a su dominio extracelular accesible, el PSMA se ha convertido en un objetivo principal para el diagnóstico por imágenes, la terapia con radioligandos, los tratamientos basados en anticuerpos y los enfoques con células inmunitarias modificadas genéticamente.

Las células HEK293-PSMA se utilizan ampliamente en la investigación oncológica y el desarrollo terapéutico para la caracterización de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el PSMA, conjugados de anticuerpos y fármacos, radiofármacos, activadores bispecíficos de células T, terapias con células CAR-T e inhibidores de moléculas pequeñas. El sistema de expresión recombinante estable permite el análisis cuantitativo de la unión del ligando, la ocupación del receptor, la densidad del antígeno, la cinética de internalización y la citotoxicidad dependiente del objetivo. Estas células son particularmente valiosas para evaluar sondas de imagen dirigidas al PSMA y plataformas de radioligandos, ya que el PSMA sufre una internalización eficiente tras la unión del ligando. Otras aplicaciones incluyen el desarrollo de ensayos de citometría de flujo, estudios de captación, ensayos con marcadores, cribado de alto rendimiento y la validación de sistemas de administración dirigida para tratamientos contra el cáncer de próstata.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Después de la descongelación, divida las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en frascos T25 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.

Para lograr una mejor adhesión y viabilidad después de descongelar las células, recomendamos utilizar frascos o placas recubiertas de colágeno para la siembra inicial tras la criorecuperación. El recubrimiento de colágeno no es necesario para el cultivo rutinario posterior de las células.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.