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Cellules MHH-ES1
Tissue
Os
Disease
Sarcome d'Ewing
Metastatic site
Ascite
Synonyms
MHH-ES-1, MHHES1

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Cellules MHH-ES1

Cell line · Product number 300136

The MHH-ES1 cell line is derived from a patient with Ewing sarcoma, a highly aggressive bone and soft tissue cancer predominantly affecting children and y...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire MHH-ES1 provient d’un patient atteint d’un sarcome d’Ewing, un cancer très agressif des os et des tissus mous qui touche principalement les enfants et les jeunes adultes. Cette lignée cellulaire constitue un modèle précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents au sarcome d’Ewing, en particulier le rôle du gène de fusion EWSR1-FLI1, caractéristique de ce type de cancer. Ce gène de fusion résulte d’une translocation entre les chromosomes 11 et 22, ce qui entraîne la production d’un facteur de transcription oncogène responsable de la tumorigenèse. La lignée MHH-ES1, à l’instar d’autres lignées cellulaires du sarcome d’Ewing, est utilisée pour étudier les voies influencées par EWSR1-FLI1, notamment les altérations de la prolifération cellulaire, de la différenciation et de l’apoptose.

Les chercheurs utilisent la lignée cellulaire MHH-ES1 pour évaluer l’efficacité de divers agents thérapeutiques ciblant les voies essentielles à la survie et à la prolifération du sarcome d’Ewing. Par exemple, elle joue un rôle essentiel dans l’évaluation d’inhibiteurs à petites molécules, de l’interférence ARN et des techniques d’édition génétique CRISPR-Cas9 visant à perturber le gène de fusion EWSR1-FLI1 ou ses effecteurs en aval. De plus, la lignée MHH-ES1 sert de modèle pour étudier les mécanismes de résistance à la chimiothérapie conventionnelle et pour identifier de nouveaux biomarqueurs permettant le diagnostic précoce et le suivi de la réponse au traitement chez les patients atteints du sarcome d’Ewing.

Tissue
Os
Disease
Sarcome d'Ewing
Metastatic site
Ascite
Synonyms
  • MHH-ES-1
  • MHHES1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Petites cellules rondes

04Identifiers

Citation
MHH-ES1 (numéro de catalogue Cytion 300136)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1411

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
1 à 2 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
Tous les 3 à 5 jours
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
12 ans
Ethnicity
Turc