Gå direkt till innehållet
MHH-ES1-celler
Vävnad
Ben
Sjukdom
Ewings sarkom
Metastaseringsställe
Ascites
Synonymer
MHH-ES-1, MHHES1

MHH-ES1-celler

Cell line · Produktnummer 300136

Cellinjen MHH-ES1 härstammar från en patient med Ewings sarkom, en mycket aggressiv form av ben- och mjukvävnadscancer som främst drabbar barn och ungdomar...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen MHH-ES1 härrör från en patient med Ewing-sarkom, en mycket aggressiv ben- och mjukdelscancer som främst drabbar barn och unga vuxna. Denna cellinje är en värdefull modell för att studera de molekylära mekanismer som ligger bakom Ewing-sarkom, i synnerhet den roll som fusionsgenen EWSR1-FLI1, som är karakteristisk för denna cancertyp, spelar. Fusionsgenen är resultatet av en translokation mellan kromosomerna 11 och 22, vilket leder till produktion av en onkogen transkriptionsfaktor som driver tumörutvecklingen. MHH-ES1, liksom andra cellinjer för Ewing-sarkom, används för att undersöka de vägar som påverkas av EWSR1-FLI1, inklusive förändringar i cellproliferation, differentiering och apoptos.

Forskare använder cellinjen MHH-ES1 för att utvärdera effekten av olika terapeutiska medel som riktar in sig på vägar som är kritiska för överlevnad och spridning av Ewing-sarkom. Den är till exempel viktig för att testa småmolekylära inhibitorer, RNA-interferens och CRISPR-Cas9-genredigeringstekniker som syftar till att störa EWSR1-FLI1-fusionsgenen eller dess nedströms effektorer. MHH-ES1 fungerar dessutom som en modell för att studera resistensmekanismer mot konventionell kemoterapi och för att identifiera nya biomarkörer för tidig diagnos och övervakning av behandlingssvar hos patienter med Ewing-sarkom.

Vävnad
Ben
Sjukdom
Ewings sarkom
Metastaseringsställe
Ascites
Synonymer
  • MHH-ES-1
  • MHHES1

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Små runda celler

04Identifierare

Källa
MHH-ES1 (Cytion katalognummer 300136)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1411

05Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 till 2 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Var 3:e till 5:e dag
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
12 år
Etnicitet
Turkiska