İçeriğe atla
MHH-ES1 Hücreleri
Doku
Kemik
Hastalık
Ewing Sarkomu
Metastaz yeri
Asit
Eş anlamlılar
MHH-ES-1, MHHES1

MHH-ES1 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300136

MHH-ES1 hücre hattı, ağırlıklı olarak çocukları ve gençleri etkileyen, son derece agresif bir kemik ve yumuşak doku kanseri olan Ewing sarkomundan muzdarip bir hastadan elde edilmiştir...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MHH-ES1 hücre hattı, ağırlıklı olarak çocukları ve genç yetişkinleri etkileyen oldukça agresif bir kemik ve yumuşak doku kanseri olan Ewing sarkomlu bir hastadan türetilmiştir. Bu hücre hattı, Ewing sarkomunun altında yatan moleküler mekanizmaları, özellikle de bu kanser türünün karakteristik özelliği olan EWSR1-FLI1 füzyon geninin rolünü incelemek için değerli bir modeldir. Füzyon geni, kromozom 11 ve 22 arasındaki bir translokasyondan kaynaklanır ve tümörigenezi yönlendiren onkojenik bir transkripsiyon faktörünün üretilmesine yol açar. MHH-ES1, diğer Ewing sarkomu hücre hatları gibi, hücre proliferasyonu, farklılaşma ve apoptozdaki değişiklikler de dahil olmak üzere EWSR1-FLI1 tarafından etkilenen yolları araştırmak için kullanılır.

Araştırmacılar, Ewing sarkomunun hayatta kalması ve çoğalması için kritik olan yolları hedef alan çeşitli terapötik ajanların etkinliğini değerlendirmek için MHH-ES1 hücre hattını kullanmaktadır. Örneğin, EWSR1-FLI1 füzyon genini veya aşağı akış efektörlerini bozmayı amaçlayan küçük molekül inhibitörlerini, RNA interferansını ve CRISPR-Cas9 gen düzenleme tekniklerini test etmede etkilidir. Ayrıca MHH-ES1, geleneksel kemoterapiye direnç mekanizmalarını incelemek ve Ewing sarkomu hastalarında erken tanı ve tedavi yanıtının izlenmesi için yeni biyobelirteçleri tanımlamak için bir model görevi görmektedir.

Doku
Kemik
Hastalık
Ewing Sarkomu
Metastaz yeri
Asit
Eş anlamlılar
  • MHH-ES-1
  • MHHES1

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Küçük yuvarlak hücreler

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MHH-ES1 (Cytion katalog numarası 300136)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1411

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 2 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
Her 3 ila 5 günde bir
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
12 yıl
Etnik köken
Türkçe