Skip to content
Tế bào MHH-ES1
Tissue
Xương
Disease
U xương Ewing
Metastatic site
Tràn dịch màng bụng
Synonyms
MHH-ES-1, MHHES1

Documents

Tế bào MHH-ES1

Cell line · Product number 300136

The MHH-ES1 cell line is derived from a patient with Ewing sarcoma, a highly aggressive bone and soft tissue cancer predominantly affecting children and y...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào MHH-ES1 được phân lập từ một bệnh nhân mắc ung thư Ewing, một loại ung thư xương và mô mềm rất ác tính, chủ yếu ảnh hưởng đến trẻ em và thanh niên. Dòng tế bào này là một mô hình quý giá để nghiên cứu các cơ chế phân tử cơ bản của ung thư Ewing, đặc biệt là vai trò của gen hợp nhất EWSR1-FLI1, đặc trưng cho loại ung thư này. Gen hợp nhất này hình thành do sự chuyển đoạn giữa nhiễm sắc thể 11 và 22, dẫn đến sản xuất yếu tố chuyển dịch gen gây ung thư, thúc đẩy quá trình hình thành khối u. MHH-ES1, giống như các dòng tế bào sarcoma Ewing khác, được sử dụng để nghiên cứu các con đường bị ảnh hưởng bởi EWSR1-FLI1, bao gồm sự thay đổi trong sự phát triển, biệt hóa và apoptosis của tế bào.

Các nhà nghiên cứu sử dụng dòng tế bào MHH-ES1 để đánh giá hiệu quả của các tác nhân điều trị nhắm vào các con đường quan trọng cho sự sống còn và tăng sinh của ung thư Ewing. Ví dụ, nó đóng vai trò quan trọng trong việc thử nghiệm các chất ức chế phân tử nhỏ, can thiệp RNA và kỹ thuật chỉnh sửa gen CRISPR-Cas9 nhằm phá vỡ gen hợp nhất EWSR1-FLI1 hoặc các yếu tố tác động hạ lưu của nó. Ngoài ra, MHH-ES1 còn được sử dụng làm mô hình để nghiên cứu các cơ chế kháng thuốc đối với hóa trị truyền thống và xác định các dấu ấn sinh học mới cho chẩn đoán sớm và theo dõi phản ứng điều trị ở bệnh nhân u Ewing.

Tissue
Xương
Disease
U xương Ewing
Metastatic site
Tràn dịch màng bụng
Synonyms
  • MHH-ES-1
  • MHHES1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào tròn nhỏ

04Identifiers

Citation
MHH-ES1 (Số catalog Cytion 300136)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1411

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 đến 2 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 3 đến 5 ngày
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
12 năm
Ethnicity
Thổ Nhĩ Kỳ