Skip to content
תאי MHH-ES1
Tissue
עצם
Disease
סרקומה של יואינג
Metastatic site
מיימת
Synonyms
MHH-ES-1, MHHES1

Documents

תאי MHH-ES1

Cell line · Product number 300136

The MHH-ES1 cell line is derived from a patient with Ewing sarcoma, a highly aggressive bone and soft tissue cancer predominantly affecting children and y...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים MHH-ES1 נגזר מחולה עם סרקומה של יואינג, סוג סרטן אגרסיבי ביותר של העצמות והרקמות הרכות הפוגע בעיקר בילדים ובמבוגרים צעירים. קו תאים זה מהווה מודל חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס סרקומה של יואינג, ובפרט תפקידו של הגן הממוזג EWSR1-FLI1, האופייני לסוג סרטן זה. הגן הממוזג נוצר כתוצאה מהעברה בין כרומוזומים 11 ו-22, המובילה לייצור גורם שעתוק אונקוגני המניע את התפתחות הגידול. MHH-ES1, כמו קווי תאים אחרים של סרקומה של יואינג, משמש לחקר המסלולים המושפעים מ-EWSR1-FLI1, כולל שינויים בשגשוג תאים, התמיינות ואפופטוזיס.

חוקרים משתמשים בקו התאים MHH-ES1 כדי להעריך את היעילות של חומרים טיפוליים שונים המכוונים למסלולים קריטיים להישרדות ולהתרבות של סרקומה מסוג יואינג. לדוגמה, הוא משמש לבדיקת מעכבי מולקולות קטנות, הפרעה ל-RNA וטכניקות עריכת גנים CRISPR-Cas9 שמטרתן לשבש את גן ה-EWSR1-FLI1 או את האפקטורים שלו. בנוסף, MHH-ES1 משמש כמודל לחקר מנגנוני עמידות לכימותרפיה קונבנציונלית ולזיהוי סמנים ביולוגיים חדשים לאבחון מוקדם ולניטור תגובת הטיפול בחולי סרקומה של יואינג.

Tissue
עצם
Disease
סרקומה של יואינג
Metastatic site
מיימת
Synonyms
  • MHH-ES-1
  • MHHES1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
תאים עגולים קטנים

04Identifiers

Citation
MHH-ES1 (מספר קטלוגי Cytion 300136)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1411

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 2 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 3 עד 5 ימים
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
12 שנים
Ethnicity
טורקי