Gå direkte til indholdet
MHH-ES1-celler
Væv
Knogle
Sygdom
Ewings sarkom
Metastasested
Ascites
Synonymer
MHH-ES-1, MHHES1

Dokumenter

MHH-ES1-celler

Cell line · Varenummer 300136

MHH-ES1-cellelinjen stammer fra en patient med Ewing-sarkom, en meget aggressiv kræftform i knogler og blødt væv, der hovedsageligt rammer børn og...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MHH-ES1-cellelinjen stammer fra en patient med Ewing-sarkom, en meget aggressiv knogle- og bløddelscancer, der primært rammer børn og unge voksne. Denne cellelinje er en værdifuld model til undersøgelse af de molekylære mekanismer, der ligger til grund for Ewing-sarkom, især den rolle, som fusionsgenet EWSR1-FLI1 spiller, hvilket er karakteristisk for denne kræfttype. Fusionsgenet er resultatet af en translokation mellem kromosom 11 og 22, hvilket fører til produktion af en onkogen transkriptionsfaktor, der driver tumorigenese. MHH-ES1 bruges ligesom andre Ewing-sarkom-cellelinjer til at undersøge de veje, der påvirkes af EWSR1-FLI1, herunder ændringer i celleproliferation, differentiering og apoptose.

Forskere bruger MHH-ES1-cellelinjen til at evaluere effekten af forskellige terapeutiske midler, der retter sig mod veje, der er kritiske for Ewing-sarkoms overlevelse og spredning. For eksempel er den medvirkende til at teste små molekylehæmmere, RNA-interferens og CRISPR-Cas9-genredigeringsteknikker, der har til formål at forstyrre EWSR1-FLI1-fusionsgenet eller dets downstream-effektorer. Derudover fungerer MHH-ES1 som en model til at studere resistensmekanismer over for konventionel kemoterapi og til at identificere nye biomarkører til tidlig diagnose og overvågning af behandlingsrespons hos Ewing-sarkompatienter.

Væv
Knogle
Sygdom
Ewings sarkom
Metastasested
Ascites
Synonymer
  • MHH-ES-1
  • MHHES1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Små runde celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MHH-ES1 (Cytion katalognummer 300136)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1411

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
12 år
Etnisk tilhørsforhold
Tyrkisk