Hep-55.1C

La lignée cellulaire d’hépatome Hep-55.1c est issue d’une tumeur hépatique de souris, plus précisément de la souche C57BL/6J. Cette lignée cellulaire se caractérise par son origine hépatocytaire, confirmée par l’analyse des protéines des filaments intermédiaires. La lignée Hep-55.1c exprime les kératines simples K8 et K18, caractéristiques des cellules hépatiques normales, ainsi que la vimentine et la kératine K19 à des degrés divers. Ces profils protéiques confirment la nature hépatocytaire de la lignée cellulaire et sa classification en tant que lignée d’hépatome.

La lignée cellulaire Hep-55.1c présente une morphologie principalement épithéliale, reflétant son origine hépatocytaire. Ce phénotype morphologique concorde avec son profil d’expression protéique. L’analyse par empreinte génétique de la lignée Hep-55.1c n’a révélé aucune anomalie structurelle majeure, ce qui indique un certain degré de stabilité génomique. Toutefois, certaines variations dans les intensités relatives de bandes spécifiques ont été observées à mesure que le nombre de passages augmentait, ce qui suggère une variabilité génomique mineure au cours de périodes de culture prolongées.

Malgré l’absence de mutations détectables du gène p53 dans les tumeurs hépatiques primaires de souris, des aberrations ont été observées dans certaines lignées d’hépatomes au cours de leur propagation in vitro. La lignée cellulaire Hep-55.1c a fait l’objet d’une analyse visant à détecter des mutations dans les gènes p53 et c-Ha-ras. L’absence de mutations détectables dans le gène p53 de cette lignée au cours des premiers passages suggère un fond génétique stable. Cette lignée cellulaire constitue un modèle précieux pour l’étude du carcinome hépatocellulaire, fournissant des informations sur les mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents à la tumorigenèse hépatique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.