Skip to content
Hep-55.1C
Tissue
Gan
Disease
Ung thư tế bào gan
Synonyms
HEP-55.1C, 55.1C

Documents

Hep-55.1C

Cell line · Product number 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào ung thư gan Hep-55.1c được phân lập từ một khối u gan của chuột, cụ thể là từ dòng chuột C57BL/6J. Dòng tế bào này có nguồn gốc từ tế bào gan, được xác nhận thông qua phân tích protein sợi trung gian. Hep-55.1c biểu hiện các keratin đơn giản K8 và K18, đặc trưng cho tế bào gan bình thường, cũng như vimentin và keratin K19 ở mức độ khác nhau. Các mẫu protein này xác nhận bản chất tế bào gan của dòng tế bào và phân loại nó là dòng tế bào ung thư gan.

Dòng tế bào Hep-55.1c có hình thái chủ yếu là biểu mô, phản ánh nguồn gốc từ tế bào gan. Hình thái này nhất quán với hồ sơ biểu hiện protein của nó. Phân tích dấu vân tay DNA của Hep-55.1c không cho thấy bất kỳ bất thường cấu trúc lớn nào, cho thấy mức độ ổn định gen. Tuy nhiên, một số thay đổi trong cường độ tương đối của các dải cụ thể đã được quan sát thấy khi số lần truyền tăng lên, gợi ý sự biến đổi gen nhẹ trong thời gian nuôi cấy kéo dài.

Mặc dù không phát hiện được đột biến p53 trong các khối u gan chuột nguyên phát, nhưng các bất thường đã được tìm thấy trong một số dòng tế bào ung thư gan trong quá trình nuôi cấy in vitro. Dòng tế bào Hep-55.1c đã được phân tích về các đột biến trong gen p53 và c-Ha-ras. Sự vắng mặt của các đột biến có thể phát hiện được trong gen p53 trong dòng này trong các lần truyền ban đầu cho thấy một nền tảng di truyền ổn định. Dòng tế bào này là một mô hình quý giá để nghiên cứu ung thư tế bào gan, cung cấp những hiểu biết về các cơ chế tế bào và phân tử cơ bản của quá trình hình thành khối u gan.

Tissue
Gan
Disease
Ung thư tế bào gan
Synonyms
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng, ở chuột C57BL/6J

04Identifiers

Citation
Hep-55.1C (Số catalog Cytion 400201)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Expression and susceptibility

Protein expression
Keratin 8, Keratin 18, Vimentin.
Mutational profile
P53 dạng hoang dã

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
Mỗi 3 đến 5 ngày
Post-thaw recovery
Bắt đầu nuôi cấy từ ống cryovial với mật độ tế bào từ 3 đến 4 x 10⁴ tế bào/cm². Các tế bào sẽ phục hồi trong vòng 24 đến 48 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J
Donor age
Người lớn