Langsung ke isi
Hep-55.1C
Tisu
Hati
Penyakit
Karsinoma hepatoseluler
Sinonim
HEP-55.1C, 55.1C

Hep-55.1C

Cell line · Nomor produk 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel hepatoma Hep-55.1c berasal dari tumor hati tikus, khususnya dari galur tikus C57BL/6J. Garis sel ini dicirikan oleh asal hepatositiknya, yang dikonfirmasi melalui analisis protein filamen menengah. Hep-55.1c mengekspresikan keratin sederhana K8 dan K18, yang merupakan ciri khas sel hati normal, serta vimentin dan keratin K19 dalam berbagai tingkat. Pola protein ini mengkonfirmasi sifat hepatositik dari garis sel dan klasifikasinya sebagai garis hepatoma.

Garis sel Hep-55.1c menampilkan morfologi yang didominasi epitel, yang mencerminkan asalnya dari hepatosit. Fenotipe morfologi ini konsisten dengan profil ekspresi proteinnya. Analisis sidik jari DNA Hep-55.1c tidak menunjukkan adanya kelainan struktural utama, yang menunjukkan tingkat stabilitas genom. Namun, beberapa perubahan dalam intensitas relatif pita spesifik diamati dengan meningkatnya jumlah bagian, menunjukkan variabilitas genom kecil selama periode kultur yang diperpanjang.

Meskipun tidak ada mutasi p53 yang terdeteksi pada tumor hati tikus primer, penyimpangan ditemukan pada beberapa garis hepatoma selama perbanyakan in vitro. Garis sel Hep-55.1c dianalisis untuk mutasi pada gen p53 dan c-Ha-ras. Tidak adanya mutasi yang terdeteksi pada gen p53 dalam garis ini selama bagian awal menunjukkan latar belakang genetik yang stabil. Garis sel ini berfungsi sebagai model yang berharga untuk mempelajari karsinoma hepatoseluler, memberikan wawasan tentang mekanisme seluler dan molekuler yang mendasari tumorigenesis hati.

Tisu
Hati
Penyakit
Karsinoma hepatoseluler
Sinonim
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus C57BL/6J

04Pengidentifikasi

Referensi
Hep-55.1C (Nomor katalog Cytion 400201)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Keratin 8, Keratin 18, Vimentin.
Profil mutasi
P53 wt

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
Setiap 3 hingga 5 hari
Pemulihan pasca-pencairan
Mulailah kultur sel dari cryovial pada kepadatan sel 3 hingga 4 x 10⁴ sel/cm². Sel-sel akan pulih dalam waktu 24 hingga 48 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
C57BL/6J
Usia donor
Dewasa