Siirry sisältöön
Hep-55.1C
Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Synonyymit
HEP-55.1C, 55.1C

Asiakirjat

Hep-55.1C

Cell line · Tuotenumero 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Hep-55.1c-hepatoomasolulinja on peräisin hiiren maksakasvaimesta, erityisesti C57BL/6J-hiirikannasta. Tälle solulinjalle on ominaista sen hepatosyyttinen alkuperä, joka on vahvistettu intermediaaristen filamenttiproteiinien analyysillä. Hep-55.1c ilmentää yksinkertaisia keratiineja K8 ja K18, jotka ovat tyypillisiä normaaleille maksasoluille, sekä vaihtelevassa määrin vimentiiniä ja keratiinia K19. Nämä proteiinimallit vahvistavat solulinjan hepatosyyttisen luonteen ja sen luokittelun hepatoomalinjaksi.

Hep-55.1c-solulinjalla on pääasiassa epiteelimorfologia, joka kuvastaa sen alkuperää hepatosyyteistä. Tämä morfologinen fenotyyppi on yhdenmukainen sen proteiiniekspressioprofiilin kanssa. Hep-55.1c:n DNA-sormenjälkianalyysi ei paljastanut merkittäviä rakenteellisia poikkeavuuksia, mikä viittaa jonkinasteiseen genomiseen vakauteen. Tiettyjen kaistojen suhteellisissa intensiteeteissä havaittiin kuitenkin joitakin muutoksia lisääntyvien läpivientien myötä, mikä viittaa vähäiseen genomiseen vaihteluun pitkien viljelyjaksojen aikana.

Vaikka hiiren maksan primaarikasvaimissa ei ollut havaittavissa p53-mutaatioita, joissakin hepatoomalinjoissa havaittiin poikkeavuuksia in vitro -lisäyksen aikana. Hep-55.1c-solulinjasta analysoitiin p53- ja c-Ha-ras-geenien mutaatiot. Koska p53-geenin mutaatioita ei havaittu tässä linjassa varhaisessa vaiheessa, se viittaa vakaaseen geneettiseen taustaan. Tämä solulinja toimii arvokkaana mallina hepatosellulaarisen karsinooman tutkimiseen, ja se tarjoaa tietoa maksan kasvainten synnyn taustalla olevista solu- ja molekyylimekanismeista.

Kudos
Maksa
Sairaus
Maksasolusyöpä
Synonyymit
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, C57BL/6J-hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
Hep-55.1C (Cytionin luettelonumero 400201)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Keratiini 8, keratiini 18, vimentiini.
Mutaatioprofiili
P53 wt

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Aloita viljely kryoputkesta solutiheydellä 3–4 x 104 solua/cm2. Solut palautuvat 24–48 tunnin kuluessa.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6J
Luovuttajan ikä
Aikuiset