Preskoči na vsebino
Hep-55.1C
Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Sinonimi
HEP-55.1C, 55.1C

Dokumenti

Hep-55.1C

Cell line · Številka izdelka 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Hepatomska celična linija Hep-55.1c je pridobljena iz tumorja jeter miši, natančneje iz seva C57BL/6J. Za to celično linijo je značilno hepatocitno poreklo, ki je potrjeno z analizo proteinov vmesnih filamentov. Hep-55.1c izraža preprosta keratina K8 in K18, ki sta značilna za normalne jetrne celice, ter v različnem obsegu tudi vimentin in keratin K19. Ti proteinski vzorci potrjujejo hepatocitno naravo celične linije in njeno uvrstitev med hepatomske linije.

Celična linija Hep-55.1c ima pretežno epitelijsko morfologijo, kar kaže na njen izvor iz hepatocitov. Ta morfološki fenotip je skladen s profilom izražanja beljakovin. Analiza prstnih odtisov DNK Hep-55.1c ni razkrila nobenih večjih strukturnih nepravilnosti, kar kaže na določeno stopnjo genomske stabilnosti. Vendar pa so bile z naraščajočim številom prehodov opažene nekatere spremembe v relativni intenzivnosti določenih pasov, kar kaže na manjšo genomsko spremenljivost v daljših obdobjih gojenja.

Kljub odsotnosti zaznavnih mutacij p53 v primarnih tumorjih jeter miši so bile med razmnoževanjem in vitro pri nekaterih hepatomskih linijah ugotovljene aberacije. Celica Hep-55.1c je bila analizirana na mutacije v genih p53 in c-Ha-ras. Odsotnost zaznavnih mutacij v genu p53 v tej liniji v zgodnjih fazah kaže na stabilno genetsko ozadje. Ta celična linija služi kot dragocen model za preučevanje hepatocelularnega karcinoma in omogoča vpogled v celične in molekularne mehanizme, na katerih temelji tumorigeneza jeter.

Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Sinonimi
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, pri miših C57BL/6J

04Identifikatorji

Navajanje vira
Hep-55.1C (kataloška številka Cytion 400201)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Keratin 8, keratin 18, vimentin.
Profil mutacij
P53 wt

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
Vsakih 3 do 5 dni
Obnova po odtaljevanju
Začnite kultiviranje iz kriovialke pri gostoti celic 3 do 4 x 104 celic/cm2. Celice se bodo obnovile v 24 do 48 urah.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C57BL/6J
Starost darovalca
Odrasli