Prejsť na obsah
Hep-55.1C
Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm
Synonymá
HEP-55.1C, 55.1C

Dokumenty

Hep-55.1C

Cell line · Číslo výrobku 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Hepatómová bunková línia Hep-55.1c je odvodená z nádoru pečene myší, konkrétne z kmeňa C57BL/6J. Táto bunková línia sa vyznačuje hepatocytárnym pôvodom, ktorý sa potvrdil analýzou proteínov intermediárnych vlákien. Hep-55.1c exprimuje jednoduché keratíny K8 a K18, ktoré sú typické pre normálne pečeňové bunky, ako aj vimentín a keratín K19 v rôznej miere. Tieto proteínové vzorce potvrdzujú hepatocytárny charakter bunkovej línie a jej klasifikáciu ako hepatómovej línie.

Bunková línia Hep-55.1c vykazuje prevažne epitelovú morfológiu, čo odráža jej pôvod z hepatocytov. Tento morfologický fenotyp je v súlade s jej profilom expresie proteínov. Analýza odtlačkov DNA Hep-55.1c neodhalila žiadne väčšie štrukturálne abnormality, čo naznačuje určitý stupeň genomickej stability. S rastúcim počtom pasáží sa však pozorovali určité zmeny v relatívnej intenzite špecifických pásov, čo naznačuje menšiu genomickú variabilitu počas dlhších kultivačných období.

Napriek neprítomnosti zistiteľných mutácií p53 v primárnych nádoroch myšej pečene sa v niektorých hepatómových líniách počas množenia in vitro zistili aberácie. Bunková línia Hep-55.1c bola analyzovaná na mutácie v génoch p53 a c-Ha-ras. Neprítomnosť zistiteľných mutácií v géne p53 v tejto línii počas prvých pasáží naznačuje stabilné genetické pozadie. Táto bunková línia slúži ako cenný model na štúdium hepatocelulárneho karcinómu a poskytuje pohľad na bunkové a molekulárne mechanizmy, ktoré sú základom tumorigenézy pečene.

Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm
Synonymá
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, u myší C57BL/6J

04Identifikátory

Citácia
Hep-55.1C (katalógové číslo Cytion 400201)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Keratín 8, keratín 18, vimentín.
Mutčný profil
P53 wt

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
Každých 3 až 5 dní
Zotavenie po rozmrazení
Začnite kultiváciu z kryovialky pri hustote buniek 3 až 4 x 104 buniek/cm2. Bunky sa zotavia do 24 až 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6J
Vek darcu
Dospelí